流式細胞術
錄入時間:2013-9-22 9:18:07
來源：betway必威西汉姆联生物
流式細胞術（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ， ＦＣＭ）是采用流式細胞儀對單個細胞或其他生物微粒進行快速定性、定量分析與分選的一門技術。ＦＣＭ可通過熒光染料標記可檢測病原菌、毒素和血清抗體，還可在細胞懸液中原位雜交產生熒光檢出被病毒感染細胞內的特異性病毒核酸（ＤＮＡ或ＲＮＡ）。流式細胞儀主要由細胞流動室（包括樣品管、鞘液管）、激光聚焦區、檢測係統、數據處理係統等４部分組成，其工作原理是將被檢測對象製備成一定濃度的細胞（微粒）懸液，經熒光染色後放入流式細胞儀的樣品管中，細胞在氣體的壓力下進入鞘液管，在鞘液的約束下，細胞（微粒）排列成單列從流動室的噴嘴高速噴出成為細胞（微粒）液粒，經熒光染色後的細胞經過激光聚焦區時受激光激發，產生散射光和熒光信號，通過一些波長選擇通透性濾光片，可以將不同波長的散射光和熒光信號區分而將單個細胞（微粒）液滴分離，並由計算機進行圖象及數據處理。現在該技術已經能夠檢測純化的ＤＮＡ可達ｐｇ級水平，在１０ｍｉｎ內可以完成數據的收集和分析。Ｃｏｈｅｎ等［３４］用熒光染料ＥＢ和光散射信號在２ｈ內分別在４３個不同來源的臨床標本中檢測出細菌。Ｔａｐｐ等［３５］使用類似方法對蘇雲金杆菌產生的毒素進行檢驗和示蹤，結果顯示ＦＣＭ比斑點ＥＬＩＳＡ法更敏感、快速。
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