半固體培養基中含有0,02%—0.3%的瓊脂，這個瓊脂量足以防止培養基的流動，從 而阻止氧分溶解到培養基中。
一種最適合的半固體培養基是在營養培養基(例如胰蛋白腖肉湯培養基或營養肉湯培養基〉中加人0.1%巰基乙酸鈉和0.02%-0.3%的瓊脂〖防止空氣流動〗，然後再分裝 到麥康凱瓶或試管中。加入0.0002%亞甲基藍(每升培養基中含有0,2ml， 1%的亞甲基藍水溶液)作為氧化還原電位指示劑。
加入營養肉湯中的這些物質，充分混勻，加熱溶解後，每管12ml分裝於150mm*16mm試管,用塞子塞緊，121℃卨壓滅菌15min。亞甲基藍作為氧化還原指示劑,氧化反 應使培養基呈藍色，還原反應後培養基為無色。此培養基經儲藏後，會變為藍綠色，使用 前應沸水浴中加熱10min，以除去氧氣。
強化梭狀芽孢杆菌培養基(RCM）
這種培養基是1954年研製的，雖然它不適合所有厭氧菌的生長，但對許多厭氧菌的計數還是有用的，例如食品樣品中的厭氧菌。中含有葡萄糖 和半胱氨酸作為還原物質，將這種培養基分裝到25ml帶有螺帽的麥康凱瓶中，不需再用 石蠟或其他物質密封，就可提供厭氧菌的生長環境。在進行厭氧菌活細胞計數的檢測中，建議使用隻作為稀釋液。
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