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振蕩與培養基密封培養法



錄入時間:2013-12-3 9:22:17 來源:betway必威西汉姆联生物

 振蕩培養法

將試管或瓶子中的固體培養基熔化後接種,再使之凝固。所用的最簡單的培養基是加人1%葡萄糖的營養瓊脂。
(1)將培養基液化,並在100℃保持10min以去掉所有溶解的氧,冷卻至45℃,立即使用。

(2)加入接種物,用手旋轉試管使試管內容物完全混合,並注意不要產生氣泡。

(3)將試管放入冷水中以使瓊脂凝固。

(4)在所需的溫度下培養。

因為氧穿透固體培養基的速度很慢,因此試管的底部很適合於厭氧菌的生長,這種方法對於微需氧菌和兼性厭氧菌也很適用。

 

培養基密封培養法

使用無菌的密封物質可以無菌地保存液體培養基。含有液體培養基的試管應在沸水浴中加熱10min以驅除溶解的氧,然後加入已滅菌的液態凡士林或石蠟密封以隔絕空氣。 接種時可將凡士林熔化,用毛細吸管吸取菌液接種(或者是將試管加熱,冷卻後立即接種,然後再用無菌的密封物質密封I

通過快速凝結反應,該方法可用來證明水或牛乳中的產氣莢膜梭狀芽孢杆菌,所用的 培養基是無氧的滅菌牛乳,按上述方法進行密封。                                              

Vaspar是一種非常有用的密封物質,它是將凡士林和石蠟以相同的比例混合熔融後製成。在培養基中加人熔化的Vaspar並使其固化後,用火焰慢慢地加熱試管的

Vaspar部分,使固化的Vaspar重新熔化並與試管壁緊密粘連以隔絕接觸麵的空氣。滅菌 的石蠟也能起到培養基密封的作用,但它不能檢測氣體的產生,而且會冇一些氧穿過液體石蠟密封層而溶解到培養基中。

 


 

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