載玻片凝集試驗

將細胞的抗原和單一的抗體混合後會發生凝集現象。抗原和抗體反應的結果是細菌細胞凝結成塊，形成絮狀物或密集的微粒。對於腸杆菌科細菌，如果是“H”型抗原（即鞭 毛抗原)和它的單一抗體發生的反應，形成絮狀物；如抗原是“0”型抗原（即菌體抗原），則 形成更為密集的微粒凝塊。

市售的抗體有兩種類：能與特定菌屬或幾種血清發生反應的多價抗體,適用於做 初步的檢測；特定的單克隆抗體，用於鑒別菌種特定的血清型。瓶裝的抗體應置於4~7℃的暗處存放，在這種存放條件，它們的使用有效期要比標示的時間長幾個月。但需 要定期地對抗體的實際效價(或濃度)進行測定。

13.2.1載玻片凝集試驗

操作步驟

(1) 取一塊幹淨、去油脂的載玻片，用蠟筆將其分成3部分，並分別標上“H”O’和 "C” (對照）;

(2) 在標有“C”的部分加上1〜2菌環生理鹽水；

(3) 在標有“H”的部分加上】滴用甲醛處理過的細菌懸浮液(見下），在標有“0”的部 分加1滴經加熱處理過的細菌懸浮液(見下）；

(4) 在標有“H”部分再加人1環沒有稀釋的多價“評’抗血清，使其與細菌懸浮液混合；

(5) 在標有“O”的部分再加入1環沒有稀釋的多價“0”抗血清，使其與細菌懸浮液 混合；

(6) 輕輕地前後晃動載玻片，在暗背景下觀察3min，如發生凝集反應，通常在30S內 會有細菌凝塊形成，對照部分不應有任何變化。

注意：每一次都必須先將接種環灼燒，冷卻後再轉移細菌懸浮液,這一操作步驟很 重要

對於可疑的沙門氏菌，推薦使用多價的沙門氏菌“O”抗體載玻片凝集試驗驗征。如 為陰性反應，用1~2組多價“H"抗體重複試驗。如依舊為陰性反應，再用傷寒沙門氏菌 的“Vi”抗體重複試驗。如需對發生凝集反應的菌種做進一步的鑒別，可使用 單一的血清因子。Harvey和Price(1961，1974)介紹過一個鑒別沙門氏菌H-抗原組的簡 單方法，如果需要對一些特殊的血清進行鑒別可使用該方法。

上一篇：血清學試驗概述

下一篇：乳膠凝集試驗