國際食品微生物專業委員會(ICMSF,1978)建議在檢測低汙染樣品時,選用磷酸鹽 緩衝蛋白腖水或胰蛋白腖大豆肉湯(含牛膽汁和亮綠,321〜322頁)進行前增菌,然後再 用腸道菌增菌肉湯進行選擇性增菌。再接種紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂選擇可疑菌株。發酵葡 萄糖的菌落為轉化酶陰性。具體方法見ISO 8523:1991對於髙汙染樣品的檢測,可以 省略非選擇性增菌的步驟,用最大可能值(MIN)方法和菌落計數法計數(見 ISO 7402:1993)o
總腸道菌計數,需要先製備10倍係列稀釋液,然後傾倒紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂 (VRBGA),選擇每克含10~100個菌落的平板計數。每個平板加15mL VRDGA (45V熔化),與接種物混勻,靜置,待瓊脂凝固後在瓊脂表麵再加5mL 45的VRBGA瓊 脂。凝固後,在適當的溫度條件下培養24hISO標準推薦使用的溫度為35℃或37℃。 但這類細菌中的一些菌株在35℃或更高的溫度下生長不良(或無生化活性)閃此,要得到真實的總腸道菌數,使用30℃的溫度培養較合適,因為這時計數結
果較高。但當要求必須使用ISO標準時,則隻能按要求進行〖除非計數在35℃或37℃ 以及30℃同時進行]。但仍建議將兩套平皿同時在30℃和35℃(或37℃)培養,並對同一 樣品在不同溫度下的計數結果進行比較和統計分析,以便決定哪個培養溫度更適用,從而 更好完成這類菌的檢測工作。
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