根據是否分解乳糖產酸產氣可以檢測下文介紹的培養基中是否存在大腸菌類細菌。 但因為許多食品中含有大量其他的碳水化合物(如蔗糖、葡萄糖和果糖），當高濃度的食品 混人培養基後，培養時可能會出現假陽性結果，這一點應引起重視。
培養溫度是一個有爭議的問題，一般使用30〜37t，但在這一溫度範圍內，培養溫度 越低，計數結果越髙。
1月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯在30℃或35℃或37℃培養（ISO4831:1991)
無菌移取lmL均質好的樣品懸液加人盛有月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯 的試管中,共移取3~5管。檢測低汙染食品時，取10mL或100mL最低稀釋度的樣品懸 液加到等體積的培養基中，每個稀釋度需加3管或5管。
分別在30℃（或37℃）培養，24h和48h後檢查生長和產氣情況(產酸的情況通 過加在試管中的pH指示劑進行檢測。當發酵管產酸且產生足夠的氣體時(即發酵管液 麵與外管液而平行），即為“可疑陽性”反應。可疑陽性結果還包栝發酵管產生少量的氣 體，但帶蓋試管液而上有氣泡冒出的情況。在常規檢測中，試管產氣即可判定為陽性結 果，而不再需要檢查產酸情況。
可疑陽性管需要轉接2 — 3環接種物到亮綠乳糖膽鹽肉湯中進行確認。將轉接試管 在35℃繼續培養48h產氣(判斷標準如上)者即為陽性結果。比較每一梯度的陽性管和 陰性管數，通過最近似值表查得可疑大腸菌群和最終確認後大腸菌群的數值。
從可疑陽性管中轉接培養物到EC培養基中，在(45.5 ±0.2)℃培養，可檢測糞大腸 菌群
.2亮綠乳糖膽鹽肉湯
也可用多管技術法替代上述方法進行大腸菌群的檢驗：即接種亮綠乳糖膽鹽肉湯 試管，在30℃（BS4285：3.7,1987）35℃或37℃培養，通過產氣來判定可疑陽 性結果。用接種環將產氣管中的培養物劃線轉接到Endo瓊脂平板、紫紅旭鹽乳糖瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板上，可驗證陽性結杲。
3麥康凱肉湯
另一種方法是用樣品稀釋液接種麥康凱肉湯後，在30℃培養48h(大腸產 氣菌計數)或37℃培養48h(大腸菌群計數)。可疑陽性管(產酸、產氣)轉接到亮綠乳糖膽鹽 肉湯中或在麥康凱瓊脂平板上劃線進行驗證。
從可疑陽性管轉接接種物到亮綠乳糖膽鹽肉湯中，並在(44±0.1)℃培養，可檢測糞 大腸菌群
4糞大腸菌群和大腸杆菌的多管技術計數法
大腸菌群的驗證結果能夠為糞大腸菌群的計數提供補充信息，糞大腸菌群可在44- 45℃分解乳糖產酸產氣（大多數情況下，把它等效於大腸杆菌）。這個實驗被稱作改良 Eijkman 試驗 0
可疑陽性管接種物可轉接到以下任一培養基中：
(1) EC 培養基，在 44.5℃培養24h(AOAO,1995
(2) 亮綠乳糖膽鹽肉湯，在(44.0±0.1)℃培養24h
在改良的Eijkman試驗中通常建議將月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯和麥康 凱肉湯綜合起來使用。轉接前試管應先將培養基加熱到培養 源度（這個試驗以前是用麥康凱肉湯在44~45℃培養、現在已被上麵列出的兩種培養基 代替了）。
I型大腸杆歯在44~45℃下為吲哚試驗陽性，因此Eijkman試驗可將轉接的蛋白腖 水試管在較高溫度培養24h，然後檢測吲哚的產生。大腸杆菌的驗證實驗 IMViC(即吲哚試驗、甲基紅試驗、V-P試驗和檸檬酸鹽利用試驗）比較費時間：因為細菌 要在35~37℃培養，苜先必須先將適當的肉湯培養物在固體培養基（該培養基有特異性 但沒有選擇性)上劃線，以獲得純菌種。
另一種速度更快的大腸杆菌計數方法是將原始樣品和稀釋液轉接到培養基中，在 30℃培養4h，然後轉移到(44,0±0.2)℃水浴巾培養18-20h:
注意：正如前文所述,大腸杆菌中的一些致病菌株(特別是EIEC和VTEC菌株）這 些試驗呈陰性。
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