刃天青的還原反應為兩個階段，首先不可逆的形成試鹵靈，顏色由藍色和紫色變為粉 紅色，然後可逆地從試鹵靈變為無色的二氫雷瑣辛，可用Lovibond比色計（如從Merck獲 得)進行試驗比色。Merck給出了從0(無色)經1(粉紅色)到6(藍色）的一組顏色的變化 對照。
①製備刃天青溶液：將一片標準片劑（Mcrck)加人到50mL冷卻的無菌蒸餾水中， 製成0,005%的刃天青標準溶液。溶液中的刃天青在光照下不穩定，因此不使用時，溶液 應保存在陰涼避光處,最好保存於冰箱，超過8h應棄掉。
②將待測樣品徹底混合,然後加10mL奶於測試管中。
③加入lmL刃天青溶液,將吸管靜置3s後，吹出剩餘液滴，吸管不要接觸奶或濕試 管壁。
④無菌橡皮塞塞住測試管，然後將測試管緩慢倒置2次(4s),將染色劑和奶混勻。
⑤將試管放入（37.5±0.5）℃水浴中記錄試管放入時間。測定大量樣品時，水浴中 的刃天青的測試管不應超過10個。lOmin排斥試驗不應超過5個,水浴時應加 蓋避光。
⑥培養時間取決於試驗的特定要求，到規定時間時，取出並觀察每個試管，完全還原的試管呈現白色，記錄為0；呈現粉白色的試管或白色和粉色摻雜的，記錄為1/2.將其他試管倒置，迅速用比色計比色如下：
在比色計的左邊放置一個沒有染色劑的混合奶空白試管，培養後的試管置於右邊，比色計要有良好的自然光源或標準人造光源。將比色計放在工作台上，從兩個空隙觀察轉動盤，直到與培養試管的顏色相同，記錄轉盤的次數，當顏色居於兩個讀數之間時，記為半值
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