(1) 觀察染色的幹玻片時經常遇到的問題大多是因對前期的染色不夠細心所造成 的。操作時應使用適當濃度的細菌懸液，在載玻片上塗一層薄的均勻的細菌塗壇。如果 塗層太厚或密度分布不均勻，很難觀察和得出結果。革蘭氏染色的脫色和複染操作少驟 也要特別小心，
(2) 如果目鏡前端較髒，會使影像的清晰度和對比度受到影響，好像是透過一層薄物 觀察細菌。這多是由於使用油鏡後沒及時將油擦下淨，鏡油逐漸在鏡頭表麵硬化造成 的。這時需要用鏡頭紙沾上二甲苯將其除去。但要注意不能經常使用二甲苯，否則會降 低鏡頭密封膠的作用。鏡油如果長期不擦，會滲透到鏡頭裏麵汙染物鏡，這時，惟一的解 決辦法隻能是更換目鏡。
(3)目鏡和聚光鏡上有汙垢時，會有微粒出現在視野中。隻需在觀察玻片時旋轉目 鏡就能證明目鏡是否幹淨。而當聚光鏡上有汙垢時，調節焦距，汙點會變得清晰或模糊。用鏡頭紙小心除去這些汙詬和塵土。有時塵汙會堆枳到目鏡內部的鏡片表麵，但目鏡相 對較容易裝卸,可以用吹吸球(從照相器材店購買)吹掉鏡筒中的塵土。
(4) 有時，還需要檢查物鏡，看其是否能夠正確定位。
(5) 所使用的載玻片和蓋玻片的厚度要合適(可查閱顯微鏡生產廠的儀器說明書）c
(6) 如果視野不平衡或光線不夠亮，檢查聚光鏡的配置是否正確。鏡台下部聚光鏡 有磨砂襯片,很容易放錯。還要檢查聚光鏡和燈泡，確保其正常居中。
(7) 如果染色的玻片在10倍或40倍物鏡下能夠聚焦,但當使用90倍或100倍物鏡 時不能聚焦，檢查載物台上的玻片是否放顛倒。
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