6.2實驗室使用商品化培養基和試劑的質量控製的測試方法
6.2.1 非選擇性分離和計數固體培養基的半定量測試方法
6.2.1.1平板的製備與保存
按照6.1.1.1中要求進行。
6.2.1.2工作菌懸液的製備
將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜作為工作菌懸液。
6.2.1.3 接種
用1 μL接種環進行平板劃線（如圖2)。A區用接種環按0.5 cm的間隔劃4條平行線，按同樣的方法 在B區和C區劃線，最後在D區內劃一條連續的曲線。同時接種兩個平板，劃線時可在培養基下麵放一 個模板圖，並按標準規定的培養條件培養平板。
圖2目標菌半定量劃線法接種模式圖
操作時用接種環而不用接種針，接種環應完全浸入培養基中。取一滿環接種物，將接種環接觸容 器邊緣3次可去除多餘的液體。劃線時，接種環與瓊脂平麵的角度應為20°〜30°。接種環壓在瓊脂表 麵的壓力和劃線速度前後一致，整個劃線應快速連續，移取液體培養物時應將接種環伸入培養液下部 分以防止環上產生氣泡或泡沫。
通常用同一個接種環對A〜D區進行劃線，操作過程不需要對接種環滅菌。但為了得到低生長指數 G，在接種不同部分時應更換接種環或對其滅菌。
6.2.1.4 計算
培養後，評價菌落的形狀、大小和生長密度，並計算生長指數G每條有比較稠密菌落生長的劃 線則G為1，每個培養皿上G最大為16如果僅一半的線有稠密菌落生長，則G為0.5如果劃線上沒有 菌落生長、生長量少於劃線的一半或菌落生長微弱，則G為0記錄每個平板的得分總和便得到G如， 菌落在A區和B區全部生長，而在C區有一半線生長，則G為10
6.2.1.5 結果解釋
目標菌在培養基上應呈現典型的生長。目標菌的生長指數G大於或等於6時，培養基可以接受。非選擇培養基的G值通常較高。
6.2.2選擇性分離和計數固體培養基的半定量測試方法
6.2.2. 1目標菌半定量測試方法
按照6.2.1中要求進行。
6.2.2.2非目標菌(選擇性）半定量測試方法
按照6.1.2.2中要求進行。
6.2.3非選擇性增菌培養基、選擇性增菌培養基和選擇性液體計數培養基的定性測試方法
6.2.3.1 培養基的製備
將培養基分裝試管，每管10 mL
6.2.3.2 工作菌懸液的製備
將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜，進行10倍係列稀釋至10-3，或采用其他方法,製備 成105 CFU/mL〜107 CFU/mL的菌懸液作為工作菌懸液。
6.2.3.3 接種
用1μL接種環取一環工作菌懸液直接接種到用於性能測試的液體培養基中，按適合的培養時間和 溫度進行培養。
6.2.3.4 結果解釋
用目測的濁度值(如0〜2)評估培養基：
—0表示無混濁；
—1表示很輕微的混濁；
—2表示嚴重的混濁。
目標菌的濁度值應為2，非目標菌的濁度值應為0或1
有時可以觀察到微生物生長後聚集成細胞團，沉積在試管或瓶子底部，發生這種情況時，小心振 蕩試管後再進行觀察。選擇性液體計數培養基目標菌應有產氣現象，非目標菌無產氣現象。
6.2.4懸浮培養基和運輸培養基的定性測試方法
6.2.4.1 培養基的製備
6.2.4.2 按照6.1.6.1中要求進行。
6.2.4.3 工作菌懸液的製備
將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜作為工作菌懸液。
6.2.4.4 接種
用1 μL接種環取一環工作菌懸液直接接種到裝有待測培養基的試管中,混勻後，立即用10μL接種 環取一環工作菌培養物劃平行線接種平板，按標準方法中規定的培養時間和溫度培養；
剩餘已接種菌液的待測培養基置20~25℃放置45 min後，再用10 μL接種環取一環工作菌培養 物劃平行線接種平板，按標準方法中規定的培養時間和溫度培養。如保存條件有特殊要求的待測培養 基，參照附錄G培養基質量控製標準要求放置或培養後再進行劃線接種。
6.2.4.5 結果觀察與解釋
接種前後平板上目標菌的生長情況應均為良好。
6.2.5 Mueller-Hinton血瓊脂的測試方法
按照6.1.7中要求進行。
6.2.6 鑒定培養基的測試方法
按照6.1.8中要求進行。
6.2.7 實驗試劑的測試方法
按照6.1.9中要求進行。
