1 一般要求
使用螺旋接種儀將樣品接種在平板上。樣品接種後,菌落即分布在螺旋軌跡上,隨半徑的增加分布得越來越稀。采用特殊的計數柵格,自平板外周向中央對平皿上的菌落進行計數,即可得到樣品中微生物的數量。
2 實驗步驟
取製備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液,以選定的模式接種於實驗所用平板,每個稀釋度接種兩塊平板,接種每一個樣品前後均按儀器設定程序對螺旋接種儀進行清洗消毒。
按相同接種模式接種懸浮液作為空白對照。
將平板按標準方法中規定的培養時間和溫度進行培養後,計數每個平板菌落數,並記錄下來。
3 菌落總數的計算和記錄
平板上菌落數符合菌落計數儀規定計數範圍的為合適範圍。如果兩個稀釋度的四個平板菌落數均在合適範圍內,則將四個平板菌落數的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數;如果隻有一個稀釋度的兩個平板菌落數在合適範圍內,則將這兩個平板菌落數的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數。
當低稀釋度的兩個平板菌落數都少於合適範圍的下限時,計算這一稀釋度兩個平板菌落數的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數。給這個數注上星號(*),表明該數是從菌落數在計數範圍之外的平板估計所得。當所有平板上的菌落數都超過合適範圍的上限時,計算高稀釋度兩個平板菌落數的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數,給這個數注上星號(*)。如果所有稀釋度的平板都沒有菌落,則以小於1乘以稀釋倍數和接種體積作為每克(毫升)樣品中的菌落數,給這個數注上星號(*)。
記錄時,隻有在換算到每克(毫升)樣品中的菌落數時,才能定下兩位有效數字,第三位數字采用四舍五入的方法記錄。也可將樣品的菌落數記錄為10的指數形式。
4 結果的表述
根據F.3歸檔計算出每克(毫升)樣品的菌落數,固體樣品以CFU/g為單位,液體樣品以CFU/mL為單位。
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