染色鏡檢
挑取純培養的單個菌落，革蘭氏染色鏡檢。蠟樣芽胞杆菌為革蘭氏陽性芽胞杆菌，大小為（1μm～1.3μm）×（3μm～5μm），芽胞呈橢圓形位於菌體中央或偏端，不膨大於菌體，菌體兩端較平整，多呈短鏈或長鏈狀排列。
生化鑒定
挑取純培養的單個菌落，進行過氧化氫酶試驗、動力試驗、硝酸鹽還原試驗、酪蛋白分解試驗、溶菌酶耐性試驗、V-P 試驗、葡萄糖利用(厭氧)試驗、根狀生長試驗、溶血試驗、蛋白質毒素結晶試驗。
溶血試驗
挑取純培養的單個可疑菌落接種於TSSB 瓊脂平板上，30 ℃±1 ℃培養24h±2 h。蠟樣芽胞杆菌菌落為淺灰色，不透明，似白色毛玻璃狀，有草綠色溶血環或完全溶血環。蘇雲金芽胞杆菌和蕈狀芽胞杆菌呈現弱的溶血現象，而多數炭疽芽胞杆菌為不溶血，巨大芽胞杆菌為不溶血。
根狀生長試驗
挑取單個可疑菌落按間隔0.5cm 左右距離劃平行直線於營養瓊脂平板上，
30 ℃±1 ℃培養24 h±2 h。蕈狀芽胞杆菌形成根狀生長的特征。蠟樣芽胞杆菌菌株不具形成根狀生長的特征。
蛋白質毒素結晶試驗
取經30 ℃±1 ℃培養24 h±2 h 並於室溫放置3 d～4 d 的營養瓊脂培養物少許於載玻片上，滴加蒸餾水混勻並塗成薄膜。經自然幹燥，微火固定後，加甲醇作用30 s 後傾去，再通過火焰幹燥，於載玻片上滴滿0.5％堿性複紅，放火焰上加熱（微見蒸氣，勿使染液沸騰)持續1 min～2 min，移去火焰，再更換染色液再次加溫染色30 s，傾去染液用潔淨自來水徹底清洗、晾幹後鏡檢。觀察有無遊離芽胞（淺紅色）和染成深紅色的菱形、正方形或其它形狀的蛋白結晶體。如發現遊離芽胞形成的不豐富，應再將培養物置室溫2 d～3 d 後進行檢查。除蘇雲金芽胞杆菌外其它芽胞杆菌不產生蛋白結晶體。
溶菌酶耐性試驗
用接種環取純菌懸液一環，接種於溶菌酶肉湯中，36 ℃±1 ℃培養24 h。蠟樣芽胞杆菌在本培養基(含0.001 ％溶菌酶)中能生長。如出現陰性反應，應繼續培養24 h。巨大芽胞杆菌不生長。
上一篇：蠟樣芽胞杆菌的分離與培養
