初步生化試驗
在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上挑取5 個～10 個典
型或可疑菌落，分別接種TSI 瓊脂，同時接種MUG-LST 肉湯，並用已知MUG陽性的大腸埃希氏菌株做對照，於36℃±1℃培養18h～24h。必要時進行氧化酶試驗和革蘭氏染色。在TSI 瓊脂中，典型菌株為斜麵與底層均呈黃色，產氣或不產氣，不產生硫化氫（H2S）。置MUG-LST 肉湯管於長波紫外燈下觀察，MUG陽性的大腸埃希氏菌株應有熒光產生，大腸埃希氏O157:H7/NM 無熒光；對分解乳糖且無熒光的菌株，在營養瓊脂平板上分純，於36℃±1℃培養18h～24h，並進行下列鑒定。
鑒定
血清學試驗
在營養瓊脂平板上挑取分純的菌落，用O157:H7 標準血清或O157 乳膠凝集試劑作玻片凝集試驗。對於H7 因子血清不凝集者，應穿刺接種半固體瓊脂，檢查動力，經連續傳代3 次，動力試驗陰性，H7 因子血清凝集陰性者，確定為無動力株。
生化試驗
用API20E 生化鑒定試劑盒或VITEK-GNI+檢測卡，按照生產商提供的使用
說明進行。大腸埃希氏菌O157:H7/NM 生化反應特征見表。
生化試驗 特征反應
三糖鐵瓊脂 底層及斜麵呈黃色，H2S 陰性
山梨醇 陰性或遲緩發酵
靛基質 陽性
MR-VP MR 陽性，VP 陰性
氧化酶 陰性
西蒙氏檸檬酸鹽 陰性
賴氨酸脫羧酶 陽性（紫色）
鳥氨酸脫羧酶 陽性（紫色）
纖維二糖發酵 陰性
棉子糖發酵 陽性
MUG 試驗 陰性（無熒光）
動力試驗 有動力或無動力
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