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ONPG試劑緩衝液試驗方法



錄入時間:2014-2-26 10:06:02 來源:betway必威西汉姆联生物

緩衝液

成分

磷酸二氫鈉(NaH2PO4˙H2O) 6.9 g

蒸餾水加至 50.0 mL

製法

將磷酸二氫鈉溶於蒸餾水中,校正pH至7.0。緩衝液置2 ℃~5 ℃冰箱保存。

ONPG溶液

成分

鄰硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG) 0.08 g

蒸餾水 15.0 mL

緩衝液 5.0 mL

製法

將ONPG 在37 ℃的蒸餾水中溶解,加入緩衝液。ONPG 溶液置2 ℃~5 ℃冰箱保存。試驗前,將所需用量的ONPG 溶液加熱至37 ℃。

試驗方法

將待檢培養物接種3%氯化鈉三糖鐵瓊脂, 36 ℃±1 ℃培養18 h。挑取1 滿環新鮮培養物接種於0.25 mL 3%氯化鈉溶液,在通風櫥中,滴加1 滴甲苯,搖勻後置37 ℃水浴5 min。加0.25 mL ONPG 溶液,36 ℃±1 ℃培養觀察24 h。陽性結果呈黃色。陰性結果則24 h 不變色。

 

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