固體和半固體樣品:稱取25 g 樣品至盛有225 mL 滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10 稀釋液。或放入盛有225 mL 無菌蒸餾水的均質袋中,用拍擊式均質器拍打2min,製成1:10 的樣品勻液。
液體樣品:以無菌吸管吸取25 mL 樣品至盛有225 mL 無菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,製成1:10 的樣品勻液。
取1 mL1:10 稀釋液注入含有9 mL 無菌水的試管中,另換一支1 mL 無菌吸管反複吹吸,此液為1:100 稀釋液。
製備10 倍係列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1 次1 mL 無菌吸管。
根據對樣品汙染狀況的估計,選擇2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進行10 倍遞增稀釋的同時,每個稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液於2 個無菌平皿內。同時分別取1 mL 稀釋液加入2 個無菌平皿作空白菌落計數25g(mL)樣品+ 225mL 無菌蒸餾水,均質10 倍係列稀釋選擇2 個~3 個適宜樣品勻液,各取1mL 分別加入無菌培養皿內每皿中加入15mL~20mL 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基報 告28℃±1℃ 5d檢樣對照
及時將15mL~20 mL 冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基(可放置於46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,並轉動平皿使其混合均勻。
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