樣品的稀釋
固體和半固體樣品:稱取25 g 樣品,放入盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質杯內,8000 r/min~10000 r/min 均質1 min~2 min,或放入盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1min~2 min,製成1:10 的樣品勻液。
液體樣品:以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,製成1:10 的樣品勻液。或放入盛有225 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1 min~2 min,製成1:10 的樣品勻液。
樣品勻液的pH 值應在6.5~7.5 之間,必要時分別用1 mol/L NaOH 或1mol/L HCl 調節。
用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1 mL,沿管壁緩緩注入9 mL 磷酸鹽緩衝液或生理鹽水的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液麵),振搖試管或換用1 支1 mL 無菌吸管反複吹打,使其混合均勻,製成1:100 的樣品勻液。
根據對樣品汙染狀況的估計,按上述操作,依次製成十倍遞增係列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1 次,換用1 支1 mL 無菌吸管或吸頭。從製備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過15 min。
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