標本處理
刮取營養平板上的過夜新鮮培養物1 環～2 環，至裝有1 mL0.85%滅菌生理鹽水的Eppendorf 管內，混勻。4 ℃～8 ℃，12 000 r/min 離心15 min，棄去上清。沉澱加入100 μL 滅菌去離子水中，混勻。100 ℃煮沸12 min，12 000 r/min離心5 min，上清即為PCR 擴增模板，可直接用於PCR 反應。
多重PCR
五種致瀉大腸埃希氏菌目的基因多重PCR 擴增加樣體係見表5。PCR 反應條件：預變性94 ℃ 5 min。變性94 ℃ 30 s，複性63 ℃ 30 s，延伸72 ℃ 1.5min，30 個循環。最後72 ℃延伸5 min
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