通過各種生化試驗，對細菌的各種特性的檢測，來斷定為哪一類或哪一種微生物。常見的有：
糖發酵試驗：葡萄糖、乳糖、木糖、蔗糖糖等
靛基質試驗、甲基紅試驗、Ｖ－Ｐ試驗
硫化氫試驗、尿素酶試驗、卵磷脂酶試驗
明膠液化試驗、霍亂紅試驗、氧化酶試驗
ＯＦ試驗、耐熱核酸酶試驗
嗜鹽性試驗
膽汁溶菌試驗
ＯＮＰＧ試驗
過氧化氫試驗
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