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單增李斯特菌分離培養基的比較和篩選



錄入時間:2014-7-2 11:47:23 來源:betway必威西汉姆联生物

MMA平板

30℃48h,在45度的光照射下為藍色或者蘭灰色,扁平圓潤,稍有凸起,邊緣整齊, 菌落較小,約為0.5mm左右。 盡管抑製性強,但與雜菌無法區別。

(無選擇性,無鑒別性)

OXA平板

單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117

24-48h,35℃培養

菌落呈黑色,直徑1mm,在其周圍形成一個黑色環。

分離原理主要是基於李斯特氏菌具有β-D-葡萄糖苷酶的活性,能水解培養基中的七葉靈,產生七葉苷,與鐵離子產生顏色反應而,使菌落為棕褐色,並帶有褐色暈圈,而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能發生這種反應(有選擇性,無鑒別性)

PALCAM

 

Lm在PALCAM培養基生長特征: 37℃24h-48h,2mm灰綠色中心凹陷,菌落周圍呈棕黑色水解圈。由於含七葉苷及檸檬酸鐵銨,中心有時為黑色。PALCAM由於加入氯化鋰及三種抑菌劑,其抑菌能力大於CHROMagar。氯化鋰抑製革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑製除李斯特氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。(強選擇性,無鑒別性)

CHROMagar顯色培養基上的菌落形態

   單增李斯特氏菌37℃培養18-24小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。伊氏(綿羊)李斯特氏菌37℃培養48小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌37℃培養24-48小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品中綿羊李斯特氏菌非常少見。(*細小針尖狀菌落)

原理

  單增李斯特氏菌顯藍色(指示劑),菌落周圍有一不透明環(酶的作用),其原理主要是此酶由毒力基因編碼的溶血素產生,而此種溶血素隻存在於單核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中,因而可以很好的將此兩種菌同李斯特氏屬的其他種分開。蛋白腖提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑製革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑製除李斯特氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。 (有選擇性,有鑒別性)

幾種分離顯色培養基的比較結論

進口PALCAM和科瑪嘉均優於進口OXA、國產PALCAM、國產OXA和MMA。背景微生物較少時,科瑪嘉的分離效果最好;背景微生物較複雜時,進口PALCAM分離效果最好。

MMA抑製性強,菌落小、形態不典型,很難與雜菌區分。進口PALCAM 、進口OXA菌落較典型,易與雜菌區分。CHROMagar菌落較典型,易與雜菌區分,對高汙染食品中的雜菌抑製性較差。

根據長期使用經驗及實驗結果結合參考文獻,修訂標準擬采用PALCAM和CHROMagar分離培養基。

回收率: 進口PALCAM和CHROMagar較高,結果穩定

 

 


 

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