取供試液10ml（相當於供試品1g、1ml）2 份，其中1 份置80℃保溫10 分鍾後迅速冷卻。上述2 份供試液直接或處理後分別接
種至100ml 的梭菌增菌培養基中，置厭氧條件下培養48 小時。取上述每一培養物0.2ml，分別塗抹接種於含慶大黴素的哥倫比亞瓊脂培養基平板上，置厭氧條件下培養48～72 小時。若平板上無菌落生長，判供試品未檢出梭菌；若平板上有菌落生長，應挑選2～3 個菌落分別進行革蘭染色和過氧化氫酶試驗。
過氧化氫酶試驗 取上述平板上的菌落，置潔淨玻片上，滴加3%過氧化氫試液，若菌落表麵有氣泡產生，為過氧化氫酶試驗陽性，否則為陰性。
若上述可疑菌落為革蘭陽性梭菌，有或無卵圓形或球形的芽孢，過氧化氫酶陰性，判供試品檢出梭菌，否則判供試品未檢出梭菌。
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