工作菌種的傳代次數應嚴格控製，不得超過5代，（從菌種保藏中心獲得的標準菌株為第0代）防止過度的傳代造成菌種變異。1代是指將活的培養物接種到新鮮培養基中，任何亞培養的形式均被認為是轉種或傳代一次。必要時，實驗室應對工作菌株的特性和純度進行確認。
細菌的接種、分離和培養
接種、分離、培養是微生物學實驗的基本
作技術，要求嚴格的無菌操作和在無菌環境下進行。
常用培養基種類
斜麵接種
半固體培養基
液體培養基
平板培養基
接種方法
塗布法
劃線法
穿刺法
直接加入法等
分離：
分段劃線法、連續劃線法、塗布分離法、傾注分離法等。
培養 ：接種後的培養基，根據不同微生物生長條件的要求，置培養基於適宜微生物生長的環境中，使其生長繁殖的過程。
需氣培養法
厭氧培養法
培養後微生物的生長判斷
固體培養基
液體培養基
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