由於某些不活潑的大腸埃希氏菌（anaerogenic E.coli）、A-D（Alkalescens-D isparbiotypes堿性-異型）菌的部分生化特征與誌賀氏菌相似，並能與某種誌賀氏菌分型血清發生凝集；因此符合誌賀氏菌屬生化特性的培養物還需另加葡萄糖胺、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(36 ℃培養24 h～48 h)。
西蒙氏檸檬酸鹽實驗
挑取少量瓊脂培養物接種，於36±1℃培養4d，每天觀察結果。陽性者斜麵上有菌落生長，培養基從綠色轉為藍色。
葡萄糖銨實驗
鑒別細菌能否利用銨鹽作為唯一氮源並分解葡萄糖產酸，溴麝香草酚蘭是指示劑，產酸時培養基由綠色變為黃色。
粘液酸鹽實驗
細菌如能利用粘液酸鹽，則可分解而產酸，使培養基中的溴麝香草酚蘭呈黃色。
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