初發酵實驗
對每個樣品，選擇適宜的三個連續稀釋度的樣品勻液，液體樣品可以包括未經稀釋的原液，每個稀釋度接種三管月桂基硫酸鹽胰蛋白腖（LST）肉湯，每管接種1mL（如接種量需要超過1mL，則用雙料LST肉湯）。36℃±1℃培養24h±2h，檢查倒管內是否有氣泡產生或輕搖試管時是否有密集連續的細小氣泡從管底逸出，如未產氣則繼續培養至48h±2h。記錄在24h和48h內產氣的LST肉湯管數。未產氣者為大腸菌群陰性；對產氣者，則進行複發酵試驗。
複發酵實驗
用直徑為3mm的接種環從所有48h±2h內發酵產氣的LST肉湯管中分別取培養物1環，移種於煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中，置36℃±1℃溫箱內，培養48h±2h，觀察產氣情況。產氣者，計為大腸菌群陽性管。
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