供試品的控製菌檢查應按經方法適用性試驗確認的方法進行。
陽性對照試驗 陽性對照試驗方法同供試品的控製菌檢查,對照菌的加量應不大於100cfu。陽性對照試驗應檢出相應的控製菌。
陰性對照試驗 以稀釋劑代替供試液照相應控製菌檢查法檢查，陰性對照試驗應無菌生長。如果陰性對照有菌生長，應進行偏差調查。
耐膽鹽革蘭陰性菌(Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria)
供試液製備和預培養 取供試品，用胰酪大豆腖液體作為稀釋劑照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液，混勻，在20～25℃培養，培養時間應使供試品中的細菌充分恢複但不增殖（約2 小時）。
未檢出試驗
除另有規定外，取相當於1g 或1mL 供試品的上述預培養物接種至腸道菌增菌液體培養基中，30～35℃培養24～48 小時後，劃線接種於紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～24 小時。如果平板上無菌落生長，判供試品未檢出耐膽鹽革蘭陰性菌。
定量試驗
選擇和分離培養 取相當於0.1g、0.01g 和0.001g（或0.1mL、0.01mL 和0.001mL）供試品的預培養物或其稀釋液分別接種至腸道菌增菌液體培養基中，30～35℃培養24～48 小時。上述每一培養物分別劃線接種於紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～24 小時。
結果判斷 若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上有菌落生長，則對應培養管為陽性，否則為陰性。根據各培養管檢查結果，從表2 查對1g 或1ml 供試品中含有耐膽鹽革蘭陰性菌的最大可能數。
大腸埃希菌(Escherichia coli)
供試液製備和增菌培養 取供試品，照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液。取相當於1g 或1mL 供試品的供試液，接種至適宜體積（經方法適用性試驗確定的）的胰酪大豆腖液體培養基中，混勻，30～35℃培養18～24 小時。
選擇和分離培養 取上述預培養物1mL 接種至100mL 麥康凱液體培養基中，42～44℃培養24～48 小時。取麥康凱液體培養物劃線接種於麥康凱瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～72 小時。
結果判斷 若麥康凱瓊脂培養基平板上有菌落生長，應進行分離、純化及適宜的鑒定試驗, 確證是否為大腸埃希菌；若麥康凱瓊脂培養基平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定結果為陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌。
沙門菌（Salmonella）
供試液製備和增菌培養 取10g 或10mL 供試品直接或處理後接種至適宜體積（經方法適用性試驗確定的）的胰酪大豆腖液體培養基中，混勻，30～35℃培養18～24 小時。
選擇和分離培養 取上述預培養物0.1mL 接種至10mL RV 沙門增菌液體培養基中，30～35℃培養18～24 小時。取少量RV 沙門菌增菌液體培養物劃線接種於木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～48 小時。
沙門菌在木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基平板上生長良好，菌落為淡紅色或無色、透明或半透明、中心有或無黑色。用接種針挑選疑似菌落於三糖鐵瓊脂培養基高層斜麵上進行斜麵和高層穿刺接種，培養18～24 小時，或采用其它適宜方法進一步鑒定。
結果判斷 若木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基平板上有疑似菌落生長，且三糖鐵瓊脂培養基的斜麵為紅色、底層為黃色，或斜麵黃色、底層黃色或黑色，應進一步進行適宜的鑒定試驗, 確證是否為沙門菌。如果平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定結果為陰性，或三糖鐵瓊脂培養基的斜麵未見紅色、底層未見黃色；或斜麵黃色、底層未見黃色黑色，判供試品未檢出沙門菌。
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）
供試液製備和增菌培養 取供試品，照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液。取相當於1g 或1mL 供試品的供試液，接種至適宜體積（經方法適用性試驗確定的）的胰酪大豆腖液體培養基中，混勻。30～35℃培養18～24 小時。
選擇和分離培養 取上述預培養物劃線接種於溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～72 小時。
取上述平板上生長的菌落進行氧化酶試驗，或采用其它適宜方法進一步鑒定。
氧化酶試驗 將潔淨濾紙片置於平皿內,用無菌玻棒取上述平板上生長的菌落塗於濾紙片上，滴加新配製的1％二鹽酸二甲基對苯二胺試液，在30 秒內若培養物呈粉紅色並逐漸變為紫紅色為氧化酶試驗陽性,否則為陰性。
結果判斷 若溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基平板上有菌落生長，且氧化酶試驗陽性，應進一步進行適宜的鑒定試驗, 確證是否為銅綠假單胞菌。如果平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定結果為陰性，或氧化酶試驗陰性，判供試品未檢出銅綠假單胞菌。
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
供試液製備和增菌培養 取供試品，照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液。取相當於1g 或1mL 供試品的供試液，接種至適宜體積（經方法適用性試驗確定的）的胰酪大豆腖液體培養基中，混勻。30～35℃培養18～24 小時。
選擇和分離培養 取上述預培養物劃線接種於甘露醇氯化鈉瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18～72 小時。
結果判斷 若甘露醇氯化鈉瓊脂培養基平板上有黃色菌落或外周有黃色環的白色菌落生長，應進行分離、純化及適宜的鑒定試驗, 確證是否為金黃色葡萄球菌；若平板上沒有與上述形態特征相符或疑似的菌落生長，或雖有相符或疑似的菌落生長但鑒定結果為陰性，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
梭菌（Clostridia）
供試液製備和熱處理 取供試品，照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液。取相當於1g 或1mL 供試品的供試液2 份，其中1 份置80℃保溫10 分鍾後迅速冷卻。
選擇和分離培養 將上述2 份供試液分別接種至適宜體積（經方法適用性試驗確定的）的梭菌增菌培養基中，置厭氧條件下30～35℃培養48 小時。取上述每一培養物少量，分別塗抹接種於哥倫比亞瓊脂培養基平板上，置厭氧條件下30～35℃培養48～72 小時。
過氧化氫酶試驗 取上述平板上生長的菌落，置潔淨玻片上，滴加3%過氧化氫試液，若菌落表麵有氣泡產生,為過氧化氫酶試驗陽性,否則為陰性。
結果判斷 若哥倫比亞瓊脂培養基平板上有帶或不帶芽孢的厭氧杆菌生長，且過氧化氫酶反應陰性的，應進一步進行適宜的鑒定試驗, 確證是否為梭菌；如果哥倫比亞瓊脂培養基平板上沒有厭氧杆菌生長，或雖有相符或疑似的菌落生長但鑒定結果為陰性，或過氧化氫酶反應陽性，判供試品未檢出梭菌。
白色念珠菌（Candida albicans）
供試液製備和增菌培養 取供試品，照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數法” （通則1105）製成1：10 供試液。取相當於1g 或1mL 供試品的供試液，接種到100mL 沙氏葡萄糖液體培養基中，混勻，30～35℃培養3～5 天。
選擇和分離 取上述預培養物劃線接種於沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上，30～35℃培養24～48 小時。
白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養基上生長的菌落呈乳白色，偶見淡黃色,表麵光滑有濃酵母氣味,培養時間稍久則菌落增大，顏色變深、質地變硬或有皺褶。挑取疑似菌落接種至念珠菌顯色培養基平板上，培養24～48 小時（必要時延長至72 小時），或采用其它適宜方法進一步鑒定。
結果判斷 若沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上有疑似菌落生長，且疑似菌在念珠菌顯色培養基平板上生長的菌落陽性反應，應進一步進行適宜的鑒定試驗, 確證是否為白色念珠菌；若沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定結果為陰性，或疑似菌在念珠菌顯色培養基平板上生長的菌落呈陰性反應，判供試品未檢出白色念珠菌。
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