固體和半固體樣品:稱取25 g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10稀釋液。或放入盛有225 mL無菌蒸餾水的均質袋中,用拍擊式均質器(不推薦使用刀片式均質器)拍打2min,製成1:10的樣品勻液。
,製成1:10的樣品勻液。
液體樣品:取25mL樣品至盛有225 mL無菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶內預臵適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,製成1:10的樣品勻液。
取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無菌水的試管中, 另換一支1mL無菌吸管反複吹吸,此液為1:100稀釋液。
樣品的稀釋不推薦使用刀片式均質器
原標準為“反複吹吸50次”(原標準為“反複吹吸50次”)。可使用漩渦混勻器。可使用漩渦混勻器拍擊式均質器
取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無菌水的試管中, 另換一支1mL無菌吸管反複吹吸原標準為“反複吹吸5次”,此液為1:100稀釋液。
製備10倍係列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1 mL無菌吸管。5.1.5根據對樣品汙染狀況的估計,選擇2個~3個(原標準為“3個”) (液體樣品可包括原液)在進行10倍遞增稀釋的同時,每個稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液於2個無菌平皿內。同時分別取1 mL稀釋液加入2個無菌平皿作空白對照。
及時將15mL~20 mL冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養基(可放置46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,並轉動平皿使其混合均勻。
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