選用和設計培養基的原則、方法
及製備過程：
原則：目的明確 、營養協調、經濟節約
物理化學條件適宜
方法：生態模擬、查閱文獻
精心設計、試驗比較
步驟：稱量、熔化、調PH、過濾、分裝、
加塞、包紮、滅菌、冷卻、無菌檢查
培養基種類：
一、按成分的不同分
天然培養基、合成培養基、半合成培養基
二、按培養基的物理狀態分
固體培養基、液體培養基、半固體培養基
三、按培養基用途
基礎培養基、選擇培養基
加富培養基、鑒別培養基
消毒與滅菌
消毒：消滅病原菌和有害微生物的營養體
滅菌：殺滅一切微生物的營養體，芽胞和孢子。
方法：
一、物理的方法：加熱、過濾、輻射
二、化學的方法：用化學試劑抑製或殺滅微生物。主要破壞細菌代謝機能。如重金屬離子，磺胺類藥物及抗生素等。
加熱法：
幹熱法：火焰灼燒滅菌和熱空氣滅菌。
1、火焰灼燒適用於接種環、接種針和金屬用具如鑷子等，試管口和瓶口，塗布用玻璃棒。
2、熱空氣滅菌利用高溫幹燥空氣（160－170C）加熱滅菌1－2h，適用於玻璃器皿和培養皿等。原理加熱使蛋白質變性，與水的含量有關，當環境和細胞含水量越大，凝固越快。
3、注意事項：
1）培養基、橡膠製品、塑料製品不能用此法；
2）溫度控製在<180°；
3）物品不能太擠；
4）溫度降至70°時才開箱門。
濕熱法 ：
原理：因為濕熱中菌體吸水，蛋白質容易凝固，因蛋白質含水量增加，所需凝固溫度降低；濕熱的蒸氣有潛熱存在。所以效果比同溫度下幹熱好。
高壓蒸汽滅菌法：
1、設備：高壓滅菌鍋
2、時間長短根據滅菌物品的種類和數量不同有所變化。
3、適用於培養基、工作服、橡膠物品等的滅菌，也可用於玻璃器皿的滅菌。
4、注意事項：
1）冷空氣徹底排除；2）加水；3）壓力降為“0”時方可打開。
常壓蒸汽滅菌：
對於不宜用高壓蒸汽滅菌的培養基如明膠培養基、牛乳培養基，含糖培養基等可采用此法。徹底滅菌則采用間歇滅菌方法。
煮沸滅菌法：
適用注射器和解剖器皿，時間10－15min，
超高溫殺菌
135-150°C和2-8s對牛乳和其它液態食品。
優點 ：保持食品價值和營養成分。
過濾除菌：
原理：介質在有壓力時阻隔微生物。
適用範圍：許多材料如血清、抗生素及糖溶液采用此法。
設備：蔡氏過濾器，濾膜過濾器。
優缺點：不破壞培養基成分，隻適用少量濾液。需 大量無菌空氣以及淨化工作台。
注意事項：1、壓力適當；
2、無菌條件下進行；
3、防止滲透現象。
輻射滅菌：
原理：紫外線波長在200－300nm，具有殺菌作用，以265-266殺菌力強。此段波長易被細胞中核酸吸收；可產生臭氧和過氧化氫。殺菌效力與強度和時間的乘積成正比。
缺點：穿透力不大。距照射物<1.2m為宜。
應用：無菌室，醫院。
注意事項：對眼睛和皮膚有刺激作用。
射線滅菌：r射線，穿透力強，適用於堆積物品的滅菌。
化學藥品滅菌：
原理：應用化學製劑破壞細菌代謝機能。
殺菌劑如重金屬離子；
抑菌劑如磺胺類及多數抗生素。
注意：與藥品的濃度高低，時間長短，微生物種類以及微生物所處的環境有關。
常用化學殺菌劑有：乙醇、醋酸、石碳酸
福爾馬林、升汞、高錳酸鉀、新潔爾滅等
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