增菌培養
第一步增菌培養：用Half-Fraser肉湯，30℃培養24h
第二步增菌培養：用Fraser肉湯，從Half-Fraser肉湯中取0.1ml培養液加入10ml Fraser肉湯中,35℃培養24-48小時。
選擇性分離培養
取0.1ml 30±2℃培養24h Half-Fraser肉湯培養物，劃線接種到PALCAM平板上， 35℃培養24-48小時，檢查有無黑色菌落，並菌落外圍有黑色環。 Fraser肉湯培養24小時，出現明顯黑色，取0.1±0.02ml培養物接種到MOX平板上35℃至少培養24小時，若Fraser肉湯培養24小時，沒有出現明顯黑色，繼續培養至48小時，出現明顯黑色，取0.1ml培養物接種到PALCAM平板上35℃至少培養24小時。若培養48小時，仍沒有出現明顯黑色，並在PALCAM上沒有可疑菌落，則此樣品為單增李斯特氏菌陰性。
ISO方法中，增菌培養采用二步增菌培養法，並可通過增菌液的顏色變化來判斷有無李斯特氏菌，所采用的增菌培養基為Half-Fraser 肉湯和Fraser肉湯。所用的分離平板為PALCAM培養基。本方法幾乎可用於所有食品中李斯特氏菌的檢測。
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