用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1.0 mL，沿管壁緩慢注於裝有9 mL0.85％生理鹽水的無菌試管中（注意吸管尖端不要觸及稀釋液），振搖試管或換用1支無菌吸管反複吹打使其混合均勻，製成1:100的樣品勻液。
另取1 mL無菌吸管或微量移液器吸頭，按上述操作順序，做10倍遞增樣品勻液，如此每遞增稀釋一次，即換用1次1 mL滅菌吸管或吸頭。
根據食品衛生標準要求或對檢樣汙染情況的估計，選擇三個連續的適宜稀釋度，每個稀釋度吸取0.1 mL稀釋液於MRS瓊脂平板或MC瓊脂平板進行表麵塗布，每個稀釋度作兩個平皿。MC瓊脂平板用於嗜熱鏈球菌的計數。含雙歧杆菌的樣品需絕對厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內培養48 h±2 h,不含雙歧杆菌的樣品需兼性厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內培養48 h±2 h,培養後選取菌落數在30～300之間的平板進行計數。乳酸菌在MRS和MC培養基上菌落生長形態特征。
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MRS瓊脂
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MC瓊脂
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乳杆菌屬
(Lactobacillus)
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平皿底為黃色，菌落中等大小，凸起，微白色，濕潤，邊緣整齊，菌落呈圓形，直徑為3.0 mm±1 mm。
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平皿底為粉紅色，菌落較小，白色或淡粉色，邊緣不太整齊，直徑2.0 mm±1 mm,可有淡淡的暈。
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雙歧杆菌屬
(Bifidobacterium)
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兼性需氧培養條件下不生長。在絕對厭氧培養條件下，平皿底為黃色，菌落中等大小，瓷白色，邊緣整齊光滑，菌落呈圓形，直徑為2.0 mm±1 mm。
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兼性需氧培養條件下不生長。在絕對厭氧培養條件下，平皿底為粉紅色，菌落較小，白色，邊緣整齊，直徑1.5 mm±1 mm,可有淡淡的暈。
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嗜熱鏈球菌
(Streptococcus thermophilus)
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平皿底為黃色，菌落偏小，白色，濕潤，邊緣整齊，菌落呈圓形，直徑為1.0 mm±1 mm。
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平皿底為粉紅色，菌落中等偏小,邊緣整齊光滑的紅色菌落，直徑2.0 mm±1 mm,可有淡淡的暈。
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