操作步驟
1 增菌
用無菌操作取樣品25g,加入有225mL的增菌液中(銀耳取樣品1g,加入有20mL的增菌液中)置於36±1℃恒溫培養箱中培養48h。
2 平板分離
取增菌液1環,劃線按種PDA平板, 36±1℃培養24~48h。
PDA平板:菌落1~2mm,灰白色或乳白色,光滑、濕潤、邊緣整齊。培養48h後,中心有凸起,呈草帽狀,菌落周圍有黃綠色素擴散到基質中。
卵黃瓊脂平板:菌落表麵光滑、濕潤,48h後,菌落周圍形成乳白色混濁環,斜射日光下可見環的表麵呈虹彩現象。
SS瓊脂平板:不生長或微弱生長。
3 純化
從卵黃瓊脂平板上挑取卵黃脂酶陽性,並帶有虹彩環的單個菌落,接種PDA斜麵, 36±1℃培養24h。
4 生化試驗
從純化培養的PDA斜麵上挑取少量菌苔,分別接種於Hugh-Leifson培養基、蛋白腖水、緩衝蛋白腖水、西檬氏檸檬酸鹽培養基、糖發酵管及苯丙氨酸培養基, 36±1℃培養,按單項試驗要求分別進行觀察。
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