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藥品無菌檢查法——培養基及其製備方法



錄入時間:2008-10-20 14:08:48 來源:青島betway必威西汉姆联 

   
   培養基應適合需氣菌、厭氣菌或真菌的生長,可按以下處方製備,亦可使用按該處
方生產的符合規定的脫水培養基。以下培養基製備時,均以115℃滅菌30分鍾。
    
    1.需氣菌、厭氣菌培養基(硫乙醇酸鹽流體培養基)                           
    酪腖(胰酶水解)   15g      氯化鈉                       2.5g         
    葡萄糖             5g       新配製的0.1%刃天青溶液        1.0ml         
    L-胱氨酸          0.5g     (或新配製的0.2%亞甲藍溶液0.5ml)         
    硫乙醇酸鈉         0.5g     瓊脂                         0.5~0.7g         
   (或硫乙醇酸0.3ml)            水                           1000ml
    酵母浸出粉         5g       
    除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分加入水內,微溫溶解後,調節pH為弱堿性,
煮沸,濾清,加入葡萄糖和刃天青溶液,搖勻,調節pH值使滅菌後為7.1±0.2,分裝,
滅菌。                                                       
    在供試品接種前, 培養基指示劑氧化層的顏色不得超過培養基深度約1/5,否則,須
經水浴煮沸加熱, 隻限加熱一次。                                        
    2.真菌培養基                                                           
    腖             5g         磷酸氫二鉀      1g     
    酵母浸出粉     2g              硫酸鎂          0.5g     
    葡萄糖         20g             水             1000ml     
    除葡萄糖外,取上述成分加入水內,微溫溶解後,調節pH值約為6.8,煮沸,加葡萄
糖溶解後,搖勻,濾清,調節pH值使滅菌後為6.4±0.2,分裝,滅菌。          
    3.選擇性培養基  
   (1) 對氨基苯甲酸培養基(用於磺胺類藥物的無菌檢查)   照上述需氣菌、厭氣菌
培養基及真菌培養基的處方及製法,各加對氨基苯甲酸0.125g,溶解後,搖勻,分裝,滅
菌。                                           
   (2) 聚山梨酯80培養基(用於油劑藥品的無菌檢查) 照上述需氣菌、厭氣菌培養基
及真菌培養基的處方及製法,各加10ml聚山梨酯80,搖勻,分裝,滅菌。    
    4.營養肉湯培養基                                                       
    腖               10g                 肉浸液          1000ml             
    氯化鈉           5g                                                     
    取腖和氯化鈉加入肉浸液內,微溫溶解後,調節pH為弱堿性,煮沸,濾清,調節pH
值使滅菌後為7.2±0.2,分裝,滅菌。                             
    5.營養瓊脂培養基                                                       
    照上述營養肉湯培養基的處方及製法,加入15~20g瓊脂,調節pH值使滅菌後為7.2
±0.2,分裝,滅菌。                                           
    6.0.5%葡萄糖肉湯培養基                                                
    腖        10g      葡萄糖         5g                                    
    氯化鈉    5g       肉浸液     1000ml                                    
    取腖和氯化鈉加入肉浸液內,微溫溶解後,調節pH為弱堿性,煮沸,加葡萄糖溶解
後,搖勻,濾清,調節pH值使滅菌後為7.2±0.2,分裝,滅菌。        
  7.真菌瓊脂培養基                                                       
    照真菌培養基的處方及製法,加入15~20g瓊脂,調節pH值使滅菌後為6.4±0.2,分
裝,滅菌,趁熱斜放使凝固成斜麵。                                 
    上述培養基分別按15ml與40ml或需要量分裝於試管功其他容器中,裝量約為試管或
容器高度的2/5,按規定的溫度和時間滅菌。細菌培養基經30~35℃培養48小時,真菌培
養基經20~25℃培養72小時後,應無菌生長。                                                            
【附注】  肉浸液製備法   取新鮮牛肉,除去肌腱及脂肪,切細,絞碎後,每1000
g加水3000ml,充分拌勻,在2~10℃浸泡20~24小時,煮沸1小時,濾過,壓幹肉渣,補
足液量,分裝,滅菌,置冷暗處備用。也可用牛肉浸出粉3g,加水1000ml,配成溶液代
替。   
   培養基質量應通過靈敏度檢查。

 

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