樣品製備
樣品的全部製備過程均應遵循無菌操作程序。
以無菌操作稱取25g樣品,放入於裝有225 mL0.85%生理鹽水的滅菌錐形瓶內,製成1:10的樣品勻液。
稀釋步驟
用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1.0 mL,沿管壁緩慢注於裝有9mL0.85%生理鹽水的無菌試管中(注意吸管尖端不要觸及稀釋液),振搖試管或換用1支無菌吸管反複吹打使其混合均勻,製成1:100的樣品勻液。
另取1mL無菌吸管或微量移液器吸頭,按上述操作順序,做10倍遞增樣品勻液,如此每遞增稀釋一次,即換用1次1mL滅菌吸管或吸頭。
根據食品衛生標準要求或對檢樣汙染情況的估計,選擇三個連續的適宜稀釋度,每個稀釋度吸取0.1 mL稀釋液於BBL瓊脂平板進行表麵塗布, 每個稀釋度作兩個平皿。絕對厭氧,36±1℃ 培養48±2 h,培養後選取菌落數在30~300之間的平板進行計數。