1.菌種 (1)藤黃微球菌(Micrococcus Luteus)[CMCC(B)28001]
(2)生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B)64941]
(3)白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001]
2.操作 (1)取藤黃微球菌的營養瓊脂斜麵和白色念珠菌的真菌培養基瓊脂斜麵的新
鮮培養物,分別用0.9%無菌氯化鈉溶液製成均勻的菌懸液;將生孢梭菌不含瓊脂的需氣
菌、厭氣菌培養基新鮮培養物,吸入無菌離心管,離心,棄去上清液,菌體用0.9%無菌
氯化鈉溶液製成均勻的菌懸液。分別取上述菌懸液,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至與細
菌濁度標準管相同的濃度, 然後作10倍係列稀釋,製成1ml中含10~100個菌並計數。 (2)將藤黃微球菌、生孢梭菌的需氣菌、厭氣菌培養基新鮮培養物,白色念珠菌的真
菌培養基的新鮮培養物1ml,用0.9%無菌氯化鈉溶液作10倍係列稀釋,製成1ml中含10~
100個菌並計數。
將藤黃微球菌的上述(1)或(2)的稀釋菌液各1ml,分別接種至每管裝量為9ml的需氣
菌、厭氣菌培養基3管,生孢梭菌的上述(1)或(2)的稀釋菌液各1ml,分別接種至每管裝
量為12ml的需氣菌、厭氣菌培養基3管,白色念珠菌的上述(1)或(2)的稀釋菌液各1ml,接
種至每管裝量為9ml的真菌培養基3管,以未接種的培養基作對照,按規定的溫度培養5天
並逐日記錄結果。
3.結果判定 以每株菌接種後的培養基不得少於2管呈現生長,即該培養基的靈敏
度檢查符合要求。
對照用菌液
1.金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)菌液 取金黃色葡萄球菌[CMCC(B)
26003]的營養瓊脂斜麵新鮮培養物1白金耳,接種至營養肉湯培養基內,在30~35℃培養
16~18小時後,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。
2.生孢梭菌(Clostridium sporogenes)菌液 取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需氣
菌、厭氣菌培養基新鮮培養物1白金耳,接種至相同培養基內,在30~35℃培養18~24小
時,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。
3.白色念珠菌(Candida albicans)菌液 取白色念珠菌[CMCC(F)98001]的真菌瓊
脂培養基斜麵新鮮培養物1白金耳,接種至真菌培養基內,在20~25℃培養24小時後,用
0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。
抑細菌和抑真菌試驗
在用直接接種法無菌檢查前,可用如下方法測定供試品是否具有抑細菌和抑真菌作
用。用需氣菌、厭氣菌培養基4管及真菌培養基2管,分別接種金黃色葡萄球菌、生孢梭
菌、白色念珠菌均10~100個菌各兩管,其中1管加供試品規定量,所有培養基管置規定
的溫度,培養3~5天。如培養基各管24小時內微生物生長良好,則供試品無抑菌作用。
如加供試品的培養基管與未加供試品的培養基管對照比較,微生物生長微弱、緩慢或不
生長,均判為供試品有抑菌作用。該供試品需用稀釋法(種入較大量培養基中)或中和
法、薄膜過濾法處理,消除供試品的抑菌性後,方可接種至培養基。
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