幹熱滅菌
(一)目的要求
1.了解幹熱滅菌的原理和應用範圍。
2.學習幹熱滅菌的操作技術。
(二)基本原理
幹熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內的蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。細胞內的蛋白質凝固性與其本身的含水量有關,在菌體受熱時,當環境和細胞內含水量越大,則蛋白蛋凝固就越快,反之含水量越少,凝固緩慢。因此,與濕熱滅菌相比,幹熱滅菌所需溫度要高(160~170℃),時間要長(1~2h),但幹熱滅菌溫度不能超過180℃,否則,包器皿的紙或棉塞就會燒焦,甚至引起燃燒。幹熱滅菌使用的電烘箱的結構如圖2-1。
(三)器材
培養皿、試管、吸管、電烘箱等。
(四)操作步驟
1.裝入待滅菌物品
將包好的待滅菌物品(培養皿、試管,吸管等)放入電烘箱內,關好箱門。
物品不要擺得太擠,以免妨礙空氣流通,滅菌物品不要接觸電烘箱內壁的鐵板,以防包裝紙烤焦起火。
2.升溫
接通電源,撥動開關,打開電烘箱排氣孔,旋動恒溫調節器至綠燈亮,讓溫度逐漸上升。當溫度升至100℃時,關閉排氣孔。在升溫過程中,如果紅燈熄滅,綠燈亮,表示箱內停止加溫,此時如果還未達到所需的160—170℃溫度,則需轉動調節器使紅燈再亮,如此反複調節,直至達到所需溫度。
3.恒溫
當溫度升達到160~170℃時,恒溫調節器會自動控製調節溫度,保持此溫度2h。
幹熱火菌過程。嚴防恒溫調節的自動控製失靈而造成安全事故。
4.降溫
切斷電源、自然降溫。
5.開箱取物
待電烘箱內溫度降到70℃以下後,打開箱門,取出滅菌物品。
電烘箱內溫度末降到70℃,切勿自行打開箱門以免驟然降溫導致玻璃器皿炸裂。
(五)實驗報告
思考題
l.在幹熱滅菌操作過程中應注意哪些問題,為什麽?
2.為什麽幹熱火菌比濕熱滅菌所需要的溫度要高,時間要長?請設計幹熱滅菌和濕熱滅菌效果比較實驗方案。
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