5.4 鑒定
5.4.1 彎曲菌屬的鑒定
5.4.1.1 概述
挑取5個（如少於5個則全部挑取）或更多的可疑菌落接種到哥倫比亞血瓊脂平板上，微需氧條件下42 ℃±1 ℃培養24 h～48 h，按照5.4.1.1～5.4.1.5進行鑒定，結果符合表1的可疑菌落確定為彎曲菌屬。
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表1 彎曲菌屬的鑒定項目 |
彎曲菌屬特性 |
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形態觀察 |
革蘭氏陰性，菌體彎曲如小逗點狀，兩菌體的末端相接時呈S形、螺旋狀或海鷗展翅狀a |
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動力觀察 |
呈現螺旋狀運動b |
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氧化酶試驗 |
陽性 |
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微需氧條件下25 ℃±1 ℃生長試驗 |
不生長 |
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有氧條件下42 ℃±1 ℃生長試驗 |
不生長 |
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a有些菌株的形態不典型。 b有些菌株的運動不明顯。 |
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5.4.1.2 形態觀察
挑取可疑菌落進行革蘭氏染色，鏡檢。
5.4.1.3 動力觀察
挑取可疑菌落用1mL 布氏肉湯懸浮，用相差顯微鏡觀察運動狀態。
5.4.1.4 氧化酶試驗
用鉑/銥接種環或玻璃棒挑取可疑菌落至氧化酶試劑潤濕的濾紙上，如果在10s內出現紫紅色、紫羅蘭或深藍色為陽性。
5.4.1.5 微需氧條件下25 ℃±1 ℃生長試驗
挑取可疑菌落，接種到哥倫比亞血瓊脂平板上，微需氧條件下25 ℃±1 ℃培養44 h±4 h，觀察細菌生長情況。
5.4.1.6 有氧條件下42 ℃±1 ℃生長試驗
挑取可疑菌落，接種到哥倫比亞血瓊脂平板上，有氧條件下42 ℃±1 ℃培養44 h±4 h，觀察細菌生長情況。
5.4.2 空腸彎曲菌的鑒定
5.4.2.1 過氧化氫酶試驗
挑取菌落，加到幹淨玻片上的3%過氧化氫溶液中，如果在30s內出現氣泡則判定結果為陽性。
5.4.2.2 馬尿酸鈉水解試驗
挑取菌落，加到盛有0.4 mL 1%馬尿酸鈉的試管中製成菌懸液。混合均勻後在36 ℃±1 ℃水浴中溫育2 h或36 ℃±1 ℃培養箱中溫育4 h。沿著試管壁緩緩加入0.2 mL茚三酮溶液，不要振蕩，在36 ℃±1 ℃的水浴或培養箱中再溫育10 min後判讀結果。若出現深紫色則為陽性；若出現淡紫色或沒有顏色變化則為陰性。
5.4.2.3 吲哚乙酸酯水解試驗
挑取菌落至吲哚乙酸酯紙片上，再滴加一滴滅菌水。如果吲哚乙酸酯水解，則在5 min～10 min內出現深藍色；若無顏色變化則表示沒有發生水解。空腸彎曲菌的鑒定結果見表2。
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表2 空腸彎曲菌的鑒定特征 |
空腸彎曲菌 （C. jejuni） |
結腸彎曲菌 （C. coli） |
海鷗彎曲菌 （C. lari） |
烏普薩拉彎曲菌 (C. upsaliensis) |
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過氧化氫酶試驗 |
＋ |
＋ |
＋ |
－或微弱 |
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馬尿酸鹽水解試驗 |
＋ |
－ |
－ |
－ |
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吲哚乙酸脂水解試驗 |
＋ |
＋ |
－ |
＋ |
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注：＋表示陽性；－表示陰性。 |
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