疏水格濾膜（HGMF）MPN值計數法

Sharpe和他的同事在20世紀70年代完善了疏水網格濾膜（HGMF）法，使用這種方法可用最小稀釋度的樣液估計出菌落形成單位cfus（或繁殖體）的數量（見Sharpe和Petekin，1988）。

美國加利福尼亞州聖迭戈QA生命科學公司是一個具有5cm×5cm過濾麵積的正方形濾膜。濾膜上的過濾麵積被黑色的疏水格線分割成1600個小方格。

在培養期間，微生物在方格中生長，並被方格的格線圍住。培養後，對有細菌生長的方格進行計數（如果采用鑒定培養基，對顯示適當的顏色反應的方格進行計數）。由於一個呈陽性的小格中不僅僅有一個菌落形成單位（cfu）或繁殖體[在本文中Sharpe指的是“生長單位”，而不是菌落形成單位（cfu）]，所以這並不是“菌落計數”。在HGFM法中，統計一個係適度有細菌生長的方格的數量就可以計算出MPN值。可用下列公式進行計算MNP值：                  Nlog

式中 N——方格中的總數（如在Iso-Grid®中，N=1600）

   x——呈陽性方格的數量

用1600格Iso-Grid®濾膜檢測樣品接種物時，合理精確的計數範圍是1〜5000。這種方法需要配置的稀釋度比運用平板或濾膜的常規菌落計數所用的稀釋度更低。當濾膜的一半方格呈陽性時，精確度更高。

在美國（見FDA,1992;AOAC,1995）和加拿大，HFMF法在食品微生物分析中是一種認可的官方方法。

Sharpe和Petekin（1988）製定了用HGMF方法進行需氧嗜溫菌和大腸菌，沙門氏菌以及李斯特菌等特定微生物技術的操做規程。

由於濾膜的方格是整齊排列的，這就可以應用自動電子技術設備對濾膜上呈陽性的方格進行計數。因為當一半方格呈陽性時，能達到最大的精度，如果人工計數這800個方格是很費勁的，很可能由於工作人員的疲勞造成計數的錯誤，因此使用自動技術設備不但能節約勞力，還能減少實驗錯誤。

代替疏水方格濾膜進行單倍稀釋的MPN值計數的一種方法是微量滴定板法。如果目標為生物在培養基中的生長可能造成顏色變化，培養後就可以使用微量滴定板自動進行檢測，這個檢測係統現已投入商業生產。例如將Qusnti-Tray與Colilert（美國緬因州IDEXX公司）結合使用進行總大腸菌群和大腸杆菌的MPN計數。

上一篇：空氣中微生物的檢測

下一篇：稀釋法平板法分離土壤中的微生物