很多化學藥劑都可以抑製微生物的生長。 最低抑製濃度(minimal inhibition concentration, MIC)是指藥物抑製微生物生長的最低濃度。由於微生物對藥物的耐受性不同,因此,最低抑製濃度是有差異的。 可以采用固體或液體培養的方式進行測定,通過製備含有不同濃度的抗生素平板,將供試菌株接種,然後將平板置適宜溫度下培養一定時間,觀察菌株生長情況。判斷MIC 可以供試菌株不生長的平板所含的藥劑濃度,也可以按重複接種點長出的菌落數少於5 個者作為MIC 標準。固體平板法的優點是在一個平板上可同時點接多個菌株。值得注意的是,當加入藥劑後,需要立即充分搖勻後再製備平板,否則藥劑分散不均勻,會影響結果。
另一種方法是液體稀釋法,將一定培養液中加入不同濃度的藥劑,配置成一定濃度梯度,再將製備好的菌懸液按一定體積接種,置一定溫度培養後,可通過肉眼或分光光度計測定濁度,以不能生長菌株的試管內藥劑的濃度為MIC, 藥劑的濃度以μ(單位)/ml 或μg/ml 表示。
本實驗學習液體法檢測鏈黴素對細菌的最低抑製濃度。
材料
1. 菌株: 大腸杆菌(E. coli); 金黃葡萄球菌(S. aureus)
2. 培養基: 牛肉膏蛋白腖培養基(液體)
3.藥劑: 鏈黴素:1000 μ(單位)/ml (過濾滅菌)
4.器皿: 無菌培養皿,無菌移液管(1ml, 5ml), 無菌試管,無菌水,分光光度計
方法
1.取活化好的菌種斜麵,分別挑取一環接種於液體培養基中,在37℃下培養6-8 小時,作為測試菌液
2.按下表配置不同鏈黴素濃度的培養基(每個試管3 個重複):
3.分別取0.2ml 菌液加入上述試管中,充分混勻,另做兩個對照,即:隻含菌和隻含藥劑
4. 將試管置37℃溫箱培養12-24 小時,取出試管,充分振蕩,用肉眼觀察每個試管濁度,也可用分光光度計檢測濁度。
結果:
注意:
1.注意菌齡適宜,接種量一致,避免人為因素幹擾結果;
2.加入藥物立即混勻後再接入菌種
3.每個處理應設3 個重複
上一篇:抗菌藥物的敏感試驗--E 試驗法
下一篇:除菌方法——過濾除菌