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致病性葡萄球菌的鑒定



錄入時間:2015-3-12 11:23:36 來源:青島betway必威西汉姆联生物

   致病性葡萄球菌的鑒定,一般實驗室都根據以下特征,其中尤以血漿凝固酶試驗意義最大。

1.產生金黃色色素。

2.對家兔或羊紅細胞有溶血作用。

3.分解甘露醇,產酸不產氣。

4.血漿凝固酶試驗陽性。

5.耐熱DNA 酶試驗陽性。

血漿疑固酶試驗

【原理】

  致病性金黃色葡萄球菌能產生一種血漿凝固酶,可使枸櫞酸鈉或肝素抗凝的人或兔等動物血漿發生凝固,凝固血漿沉積於菌體表麵,阻礙吞噬細胞的吞噬:即使被吞噬也不易被殺死。它與葡萄球菌感染局限化有關。

【材料】

  金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌培養物各一支,兔血漿、生理鹽水、小試管。

【方法】

1.取無菌試管三支,分別加入兔血漿,每支2~3ml

2.以接種環從血瓊脂平板上挑取二種葡萄球菌菌落,分別混懸於二支兔血漿內,另一支為對照。

3.將三支兔血漿放置37℃水浴箱內孵育2 小時。

4.取出觀察結果,陽性為試管內血漿凝固成塊狀。

耐熱DNA 酶試驗

【原理】

  致病性葡萄球菌能產生DNA 酶,它可特異地分解DNA 的磷酸戊糖聯結的磷酸二酯鍵;且有明顯耐熱性,經18015 分鍾或602 小時也不滅活。此酶最適pH9.0,在含DNA 基質的瓊脂一Tris 緩衝液中(PH9.0),隨DNA 被分解指示劑甲苯胺藍從藍色變粉紅色。

【材料】

  經100℃煮沸15 分鍾後的金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌24 小時液體培養物;甲苯胺藍-DNA-瓊脂(PH9.0)

【方法】

1.取裝有3ml 甲苯胺藍-DNA-瓊脂培養基的小試管置沸水浴中溶化,澆小玻片一塊(瓊脂全部用完),待瓊脂冷卻凝固後,以3mm 直徑打孔器打2 個孔。

2.用無菌滴管吸取加熱冷卻後的金黃色葡萄球菌或表皮葡萄球菌菌液,加人不同的小孔中,置37℃培養2~3 小時後觀察結果。

3.凡小孔周圍出現透明粉紅色小圈者為陽性,小孔周圍仍為藍色不透明者為陰性。

注:指示劑甲苯胺藍在酸性中呈紅色,在中性或弱堿性溶液中呈藍色。

 

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