一、目的
學習並掌握細菌芽孢染色的方法及原理。
二、原理
細菌的芽孢具有一層結構構致密的芽孢壁，通透性差、著色較難，用普通染色法染色菌體著色而芽孢呈現不染色的輪廓，但特殊處理（加熱染色或腐蝕性藥物處理）色素即可，透過芽孢壁使芽孢著色，一經著色便不易褪色，脫色時隻能脫掉菌體的顏色而保留芽孢的顏色。因此，如再換另一種顏色的染液複染菌體，便會使菌體和芽孢呈不同顏色的鮮明對照。
三、材料
1.菌種 枯草芽孢杆菌。
2.儀器及其他 顯微鏡，接種環、酒精燈、載玻片、7.6%的孔雀綠染色液、 0.5%的蕃紅、石炭酸複紅、美藍、吸水紙、枯草芽孢杆菌、水浴鍋或小燒杯與三角架。
四、方法與步驟
1.孔雀綠蕃紅芽孢染色法
（1）塗片經火焰固定，滴定孔雀綠染液於塗片上，加熱至產生蒸汽達3~5min (加熱時要慢慢來回移動，添加染液勿使塗片幹燥)。
(2）水洗後，再用蕃紅染液複染1-2min。
（3）水洗、幹燥、鏡檢、繪圖。芽孢被染上綠色，營養體呈紅色。
2.石炭酸複紅染色法
（1）試管一支.加蒸餾水3〜4滴，取1〜2環芽抱杆菌於水中，並充分搖蕩製成均勻的懸浮液。
（2）滴加等量3〜4滴石炭酸複紅液搖勻，水浴煮沸10min以上。
（3）取上述加熱後的染色菌懸液2〜3環於載玻片上製成塗片，然後經過幹燥、火焰固定、水洗。
（4）美藍複染3~4min，經水洗、幹燥後，鏡檢，繪圖。
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