一、目的
放線菌是介丁細菌與真菌之間的一類微生物,其菌體為絲狀體,伸人培養基內的為基內菌絲,也稱營養菌絲,生長在培養基表麵的為氣生菌絲。氣生菌絲的上麵可分化形成孢子絲,有各種形狀,如直立、波浪、螺旋等。孢子絲可進一步分化形成孢於,孢子的形狀大小也不相同,是分類的重要依據。
放線菌的菌落早期和細菌菌落相似,後期形成孢子菌落呈粉狀、幹燥,有各種顏色,
呈同心圓放射狀。
通過實驗認識放線菌的菌絲及孢子絲的形態和放線菌的菌落特征。
二、材料
顯微鏡、載玻片、酒精燈、接種環、石炭酸複紅、解剖刀、蓋玻片、培養皿、高氏1號合成培養基、豐加鏈黴菌及菌落。
三、方法與步驟
(一)水浸片法的製作及觀察
(1)取潔淨載玻片,滴加無菌水一滴。
(2)用接種環挑取經過28~30℃培養4~5d的放線菌菌落少許,置於載玻片的無菌水滴內。
(3)取潔淨蓋玻片一塊,先將蓋玻片,端與液滴接觸,然後將整個玻片慢慢放下避免產生氣泡。置於顯微鏡下用高倍鏡觀察。
(二)印片法的製作及觀察
此法的優點是不打亂孢子的排列狀態。
1.取菌 取2片幹淨的載玻片,用解剖刀切取一個完整的放線菌菌落(帶培養基切下),放在一載玻片的中央(注意菌落應正放)。然後將另一載玻片在酒精燈下微微加熱後,蓋在這一菌落上麵,用接種環或解剖刀輕輕按壓,然後小心拿下上麵這塊玻片(不可在菌落上移動)。
2.固定 將取下的這塊玻片,通過火焰固定。
3.染色 用石炭酸複紅染色30s,然後水洗,風幹。
4.鏡檢
(三〉埋片法的製作及觀察
(1)將培養基融化後倒入平板,待凝固後挑取少量放線菌孢子接人培養基上,在接種線旁傾斜插人無菌蓋玻片。
(2)28〜30℃培養4〜5d後,菌絲沿玻片向上生長,待菌絲長好後,取出玻片放在一幹淨載玻片上,置於顯微鏡下觀察。
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