（1）李斯特菌能水解七葉甘，除格氏李斯特菌外，其他李斯特菌均不能分解甘露醇產酸。在牛津瓊脂平板上，李斯特菌菌落直徑為2〜3mm，帶有黑褐色或黑色暈輪（七葉苷水解所形成），菌落的中心經常是下凹的；在PALCAM瓊脂上，李斯特菌菌落直徑為1.5〜2mm，綠色並帶有黑色的暈輪（或菌落中心為黑色）。
（2）驗證時，挑取5個典型的菌落，每個菌落劃線接種到胰蛋白腖大豆酵母浸膏瓊脂（TSYEA）上，置於35℃或37℃需氧培養24〜48h,分離平板上的單個菌落以確保菌株的純度。
（3）檢查TSYEA平板上生長的單個菌落,使用亨利描述的菌落特征進行分離。亨利認為李斯特菌在TYS平板上生成細小的、半透明的菌落，菌落呈藍色、藍綠色或藍灰色，菌落表麵為細小的顆粒狀,類似於粗糙的磨砂玻璃。
從TSYES平板上挑取一個單個的菌落，分別接種於胰蛋白腖大豆酵母浸膏肉湯
TSYEB試管和胰蛋白腖大豆酵母浸膏瓊脂TSYEA斜麵上，25℃培養18〜24h。
（4）①用TSYEB肉湯培養物進行菌體運動試驗和革蘭氏染色。李斯特菌屬呈翻筋鬥運動，注意與振蕩培養後非致病性李斯特菌的快速直線運動進行區別。李斯特菌為小的、革蘭氏陽性的、無孢子的短杆菌。
②用TSYEB斜麵上的生長物進行過氧化氫酶和氧化酶試驗。李斯特菌過氧化氫酶試驗陽性，氧化酶試驗陰性。
③用TSYEB斜麵上的培養物接種下列培養基，進行驗證和鑒定試驗：
a. 接種D-葡萄糖、D-水楊苷、L-鼠李糖、D-木糖發酵肉湯(含有溴甲酚紫；見附
錄1，置35℃或37℃培養7d每天檢查產酸的情況(生化管由紫色變為黃色)。
b. 接種硝酸鹽蛋白腖水，檢査硝酸鹽的產生情況。在35℃或37℃培養 5d。
c. 使用金黃色葡萄球菌和馬紅球菌進行CAMP試驗。在35℃或37℃培養24h。
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