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大腸菌群、金黃色葡萄球菌檢驗中常見問題分析



錄入時間:2015-4-15 10:08:20 來源:青島betway必威西汉姆联生物

大腸菌群

大腸菌群:是隻一群能發酵乳糖、產酸、產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏無芽孢杆菌 。該菌主要來源於人畜糞便。

檢測該菌的方法主要有MPN法,平板計數法。

     MPN法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉湯等。

     平板計數法主要用DC、VRBA等。

在檢測該菌時易出現的問題:

 1、  LST、BGLB、EC等在滅菌時小倒管中氣泡排不盡。

 2、氣泡不易觀察。

 3、VRBA、DC平板上菌落特征不易辨認。 

原因: 

  1、在分裝LST、BGLB、EC時,小倒管中有水柱;此外,高壓滅菌時,需急排氣,滅菌後迅速冷卻。

  2、觀察氣泡時,要對光傾斜試管,使小倒管緊貼在試管壁上,便於觀察。

  3、熟悉大腸杆、大腸菌群在上述平板上的特征,必要可做一些陽性的對照。有些食物殘渣會影響觀察結果,這樣需要我們在培養前仔細觀察平板的狀態,大的食物殘渣可以做一些標記。

金黃色葡萄球菌 

金黃色葡萄球菌:是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、敗血症等,其毒性的強弱取決於產生的毒素和侵襲性酶,例溶血素酶、殺白細胞素、血漿凝固酶、脫氧核糖核酸酶。

B-P瓊脂上金黃色葡萄球菌有黑色的菌落中心,周圍有半透明的卵磷脂沉澱環。

甘露醇卵黃瓊脂上的特征是菌落黃色,周圍也有卵磷脂沉澱環。 

甘露醇高鹽瓊脂上的菌落特征與甘露醇卵黃瓊脂上的菌落特征相同,不過,菌落周圍沒有卵磷脂沉澱環。

金黃色葡萄球菌在B-P上的菌落特征

檢樣中常見的問題:

1、平板的狀態:透明、有絮狀物。

2、凝固酶實驗的觀察。

原因:

1、不同的廠家的培養基平板製好後的狀態有所不同,主要取決於亞碲酸鉀卵黃增菌液的不同。我們公司采用的雞蛋是山雞蛋,卵磷脂含量較高,因此製備好的平板一般透明度較好,接種金黃色葡萄球菌後,菌落特征較易觀察。

2、在添加亞碲酸鉀卵黃增菌液時,溫度的掌握,不宜太高,過高易使卵黃變性,也不應太低,太低瓊脂易凝固。

3、將金黃色葡萄球菌接種到兔血漿上後,每半小時觀察一次,觀察凝固時,將血漿輕輕傾斜或慢慢倒置,如有流動,既證明沒有凝固。如若不明顯,可補做DNA酶實驗。

 

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