1.薄膜過濾法
薄膜過濾法應優先采用封閉式薄膜過濾器,也可使用一般薄膜過濾器。無菌檢查用的濾膜孔徑應不大於0.45μm。直徑約為50mm。根據供試品及其溶劑的特性選擇濾膜材質。抗生素供試品應選擇低吸附的濾器及濾膜。濾器及濾膜的使用應采用適宜的方法滅菌。使用時,應保證濾膜在過濾前後的完整性。
水溶性供試液過濾前先將少量的衝洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品,其濾膜和過濾器在使用前應充分幹燥,為發揮濾膜到最大過濾效率,應注意保持供試品的溶液及衝洗液覆蓋整個濾膜表麵。供試液經濾膜過濾後,若需要用衝洗液衝洗濾膜,每張濾膜每次衝洗量一般為100ml,總衝洗量不得超過1000ml,以避免濾膜上的微生物受損傷。
水溶液供試品 取規定量,直接過濾,或混合至含濕量稀釋液的無菌容器內,混勻,立即過濾。如供試品具有抑菌作用或含防腐劑,須用衝洗液衝洗濾膜,衝洗次數一般不少於三次,所用的衝洗量、衝洗方法同方法驗證試驗。衝洗後,如用封閉式薄膜過濾器,取出濾膜,將其分成3分,分別置於含50ml硫乙醇酸鹽流體培養基及改良馬丁培養基容器內,其中一份做陽性對照用。
可溶於水的固體製劑供試品 取規定量,駕駛儀的稀釋液溶解或按標簽說明複溶,然後照水溶液供試品項下的方法操作。
ß-內酰胺類抗生素供試品 取規定量,按水溶液或固體製劑供試品的處理方法處
理,立即過濾,用適宜的衝洗液衝洗濾膜。再用含適量ß內酰胺酶的衝洗液清除殘留
在濾筒、濾膜上的抗生素後接種培養基,必要時培養基中可加少量的ß內酰胺酶;或
將濾膜直接接種至含適量ß內酰胺酶的培養基中。接種培養基照水溶液供試品項下的
方法操作。
非水溶性製劑供試品 取規定量,直接過濾;或混合溶於含聚山梨酯80 或其他
適宜乳化劑的稀釋液中,充分混合,立即過濾。用含0.1~1%聚山梨酯80 的衝洗液衝
洗濾膜至少3 次。濾膜於含或不含聚山梨酯80 的培養基中培養。接種培養基照水溶
液供試品項下的方法操作。
可溶於十四烷酸異丙酯的膏劑和粘性油劑供試品 取規定量,混合至適量的無菌十四烷酸異丙酯①中,劇烈振搖,使供試品充分溶解,如果需要可適當加熱,但溫度不得超過44℃,趁熱迅速過濾。對仍然無法過濾的供試品,於含有適量的無菌十四烷酸異丙酯中的供試液中加入不少於100ml 的稀釋液,充分振搖萃取,靜置,取下層水相作為供試液過濾。過濾後濾膜衝洗及接種培養基照非水溶性製劑供試品項下的方法操作。
無菌氣(噴)霧劑供試品 取規定量,將各容器置至少-20℃的冰室冷凍約1 小時。以無菌操作迅速在容器上端鑽一小孔,釋放拋射劑後再無菌開啟容器,並將供試液轉移至無菌容器中,然後照水溶液或非水溶性製劑供試品項下的方法操作。
裝有藥物的注射器供試品 取規定量,排出注射器中的內容物,若需要可吸入稀釋液
或標簽所示的溶劑溶解,直接過濾,或混合至含適量稀釋液的無菌容器內,混勻,立即過濾。然後按水溶性供試品項下方法操作。
同時應采用直接接種法進行包裝中所配帶的無菌針頭的無菌檢查。
具有導管的醫療器具(輸血、輸液袋等)供試品 取規定量,每個最小包裝用50~100ml 衝洗液分別衝洗內壁,收集衝洗液於無菌容器中,然後照水溶液供試品項下方法操作。同時應采用直接接種法進行包裝中所配帶的針頭的無菌檢查。
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