一、目的
目的是確定各種重要表麵存在的活體微生物，包括層流工作台，實驗設備（集菌儀），實驗室人員。
二、方法：接觸碟法、擦拭法
1、接觸碟法：是將充滿規定的瓊脂培養基的接觸碟對規則表麵或平麵進行取樣，然後至合適的溫度下培養一定時間並計數。
適用範圍：實驗人員及實驗台麵等
接觸碟：直徑55cm
取樣麵積：約為25cm2
結果報告：CFU/碟
培養基：種類、培養條件、培養基質量同沉降菌監測
自製接觸碟
與之接觸碟（商品化）
三層嚴密包裝，內層真空封裝
高壓滅菌+鈷60輻射滅菌，確保產品無菌
培養基應具有極強的彈性、持水性，不會出現滲水現象。
2-8攝氏度保存，一般保質期半年
可根據客戶需求在培養基中添加青黴素酶等催化酶，用於去除生產中產生的抗生素粉塵的抗菌性。
監測步驟：
1）從冷藏櫃中取出接觸皿，並恢複至室溫。
2）將包裝整體送入取樣地點，在此過程中逐步去掉外麵兩層包裝，最後一層真空包裝在操作間打開。
3）打開接觸皿上蓋，使培養基充分接觸待測表麵，必要使用手指輕輕按壓接觸皿外側底部中心約10秒，輕輕抬起，將上蓋從接觸皿一側小心蓋上。
4）在接觸皿磨砂區域標記取樣地點、取樣時間和取樣人。
5）取樣後的清理：用消毒劑或殺孢子劑擦拭測試區域，以消除培養基的殘留。
6）將接觸皿從潔淨室取出，按規定的溫度和時間倒置培養。
7）觀察、計數
注意：
1）表麵微生物檢測要在實驗結束後進行。
2）消毒劑殘留物對監測的影響
測試表麵接觸時，接觸皿往往會接觸清洗或消毒潔淨室的消毒劑殘留物。數百種不同的殺菌劑用於世界各地的製藥設施，事實上許多監管機構希望看到輪流使用不同消毒原理的兩種消毒劑，這些不同的消毒物質會抑製接觸板上汙染物的生長。
為抵製這些消毒劑的生長抑製性質，中和劑被添加到培養基中。卵磷脂，聚山梨醇酯80，組氨酸和硫代硫酸鈉的適當組合被認定能中和高達80%的常用消毒劑。
3）方法驗證的問題
環境中分離的代表菌；代表性試驗表明；回收率
4）取樣部位
頭部、口罩、肩部、前胸、前臂、手腕、腿部/靴子、眼罩
5）限度的理解：A級＜1cfu/碟
舉例：監測了4個部位（人員）（左上臂接近手腕處，右上臂接近手腕處、前胸、口罩外表麵）
不合格結果：4個接觸碟平均菌落數≥1cfu
2、擦拭法：采用合適尺寸的無菌模板或標尺確定擦拭的麵積，無菌拭子取樣後，拭子置合適的緩衝液或培養基中，充分振蕩，再用適應的方法計數。是接觸碟法的補充。
浸濕液：通常為無菌生理鹽水或0.1%的蛋白腖溶液約5毫升
培養基：TSA
計數法：平皿塗布法、平皿澆注法、薄膜過濾貼膜法
拭子頭：材料類型包括聚酯、聚氨酯、尼龍和棉
棉簽頭：需要靈活、耐足夠長的時間，達到難以達到的地點，如管道內部。
操作：
1、浸濕拭子：開啟裝有約為5ml的無菌浸濕液的小試管（到帶有螺旋帽的），將拭子頭部浸濕，緊貼管內壁轉動，擠壓出多餘的溶液。
2、擦拭表麵：拿住拭子柄與待測物表麵成30度角，緩慢並全部塗抹待測物表麵三次，沒塗抹一次注意翻轉拭子頭的方向。
3、塗抹後折斷拭子頭放入浸濕液試管中蓋上帽，充分振蕩帶拭子的試管10秒，取出1ml混懸液接種到滅菌平皿中。
4、澆注滅菌TSA培養基 ，培養，計數。
注意：
1）表麵微生物檢測要在試驗結束後進行
2）消毒劑殘留物對監測的影響
3）取樣位置
4）取樣方式
5）方法驗證問題
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