日常實驗中，經常會遇到大腸杆菌需要觀察熒光的情況。國標4789.38-2012大腸埃希氏菌計數中第二法（VRBA-MUG計數），GB/T5750.12-2006水及水源水中的大腸埃希氏菌檢驗，都需要觀察熒光，可見熒光結果觀察的重要性。
MUG，是4-甲基傘形酮-β-D半乳糖苷的縮寫，該物質為β-半乳糖苷酶與MUG結合並剪切β-半乳糖苷鍵，釋放熒光顯色團4-甲基傘形酮，在紫外光（λ=366nm）下觀察，培養物發出藍色熒光。
觀察熒光的條件：
1）在紫外光為366nm波長；
2）在黑暗的環境下觀察，有助於更好地觀察熒光；
3）紫外燈燈管最好直接照射在待測平板或試管上，無玻璃等物品吸收紫外光；
4）使用空白管、陽性菌、陰性菌做對照。
5）推薦使用簡易便攜式熒光檢測燈，不但具備以上三個要求，而且避免了紫外光對人直接照射的情況，對試驗人員有所保護。
空白產熒光原因分析：
1）試管或平皿洗刷不幹淨所致，試管或平皿中殘留4-甲基傘形酮，會導致空白有熒光。
2）觀察熒光的紫外燈不合適，紫外燈的波長雖為366nm，但外側有玻璃燈罩，或者功率太大（瓦數高或燈太亮）均會影響熒光效果。
3）試管或平皿本身原因。有些試管或平皿本身由於質量原因，在紫外燈下自身就帶有光亮。使用前，可以先拿幾種試管或平皿裝入蒸餾水，在紫外燈下觀察一下，然後挑取亮度較暗的使用。
建議：
建議做熒光試驗時，采用陽性對照菌同時觀察，可簡單明了。
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