品紅亞硫酸鈉瓊脂培養基的工作原理:
乳糖發酵的細菌產生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結合形成紅色菌落,快速發酵乳糖的細菌產生金屬光澤,不發酵乳糖的細菌形成無色透明的菌落。品紅亞硫酸鈉瓊脂培養基中的蛋白腖、酵母粉、牛肉粉可提供碳氮源、維生素和礦物質;乳糖為可發酵的糖類;瓊脂是培養基的凝固劑;磷酸氫二鉀為緩衝劑;亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色,發酵乳糖的細菌產生乙醛,與亞硫酸鈉和堿性品紅生成紅色菌落。
品紅亞硫酸鈉瓊脂培養基配製及使用時的一些注意事項:
(1)堿性品紅是一種堿性染料,微溶於水,在水中的溶解度為1%,能溶於乙醇,在無水乙醇中的溶解度為8%,因此在配製培養基時應先用無水乙醇將堿性品紅充分溶解後再加入。
(2)堿性品紅的顏色來源於它的大共軛體係,亞硫酸鹽能破壞品紅的大共軛體係使品紅褪色,加熱能否恢複成紅色就看其共軛結構能否恢複,因此我們會看到品紅亞硫酸鈉培養基在滅菌前是淡紅色的,滅菌後溫度高時為紅色,待冷卻後紅色會褪色。倒好的平板放置時間過長可能會使紅色加深,因此要及時使用。
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