維生素B12測定培養基是一種微生物檢測液體培養基，主要用於嬰兒食品和乳粉中維生素B12測定。
該培養基的配製及使用方法為：稱取本品 7.6g加熱攪拌溶解於 100ml蒸餾水中,煮沸 2-3分鍾,分裝試管,每管 5ml，使沉澱物分散均勻，加入標準品或測試樣品，用蒸餾水補體積至 10ml,121℃高壓滅菌 5分鍾，備用。具體維生素B12的測定方法參照GB 541314-2010食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定。
由於維生素B12在某些特定環境中極易分解，測定維生素B12的實驗過程要求嚴格，因此要格外注意以下幾點：
1.準備玻璃儀器時，使用活性劑對硬玻璃測定管及其他必要的玻璃器皿進行清洗，清洗之後要求在200℃幹熱2 h。
2.使用本品前必須檢查培養基是否超出質保期，有無汙染、吸潮結塊現象，高壓滅菌後是否有沉澱，如存在上述問題不得使用。
3.為保證實驗結果準確，樣品必須盡快接種培養，實驗全過程避光，忌高溫，控製培養pH 5.5-6.3（pH用1N的HCL和1N的NaOH調製）。
4.滅菌：121℃高壓滅菌 5分鍾後迅速冷卻使用為宜。
5.培養基僅用於外部診斷。
6.培養後須做滅菌處理。
為什麽實驗過程要保持避光？
主要是由於維生素B12見光（紫外線）極易分解，若不避光將會嚴重影響測定結果，甚至導致標準曲線難以測定。
為什麽維生素B12測定培養基高壓滅菌時間短？
因為維生素B12測定培養基中含有大量的氨基酸、嘌呤、糖等物質，如果滅菌的溫度太高，營養成分會被破壞培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
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