經常有客戶問LST產氣了就說明有細菌利用乳糖產氣了，為什麽還要進行第二步確證試驗呢？為什麽LST產氣了，但BGLB沒有產氣等一係列問題。
大腸菌群是發酵乳糖、產酸產氣，需養或兼性厭氧無芽孢杆菌。在LST和BGLB中都是乳糖，既然在LST中能夠產氣，那麽理論上在BGLB中也能夠產氣。在LST中月桂基硫酸鹽抑製非大腸菌群細菌的生長，在BGLB中煌綠和牛膽粉抑製非腸杆菌科細菌生長。這問題涉及到為什麽要進行第二步確證試驗了。
其實，在前一道實驗時，常常因為樣品稀釋液帶有一些幹擾物質，導致別的發酵結果而產氣。所以，才要做第二步，要是第一部第二步都完全一樣，那就沒有必要做確證試驗了。
LST是以修複為主，第一步產氣除了幹擾物質外就是大腸菌群使得產氣，而BGLB是具有強選擇性。特別樣品中有複合膨化劑，LST是常“產氣”但是假陽性，BGLB大都不變色不產氣的。所以要進行第二步確證試驗。
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