計數培養基適用性檢查
1、一般要求
2、胰酪大豆腖瓊脂(TSA)
無菌性檢查:取已滅菌TSA注皿,於30-35℃培養3天,應無菌落生長。
試驗用菌種:金葡、銅綠、枯草、白念、黑曲
接種方法:
塗布法:分別接種不大於100cfu試驗用菌懸液於TSA平板表麵;
傾注法:分別接種不大於100cfu試驗用菌懸液於無菌平皿中,傾注約15ml該培養基,輕輕搖勻。
適用性檢查:枯草芽孢杆菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌於30-35℃培養不超過3天;白色念珠菌、黑曲黴於30-35℃培養不超過5天。
判斷標準:與對照培養基比較,菌落平均數比值在0.5-2(50%-200%)範圍內,且菌落形態大小一致。
3、胰酪大豆腖液體(TSB)
無菌性檢查:取已滅菌的TSB,於30-35℃培養不少於3天,培養基應澄清。
試驗用菌種:金葡、銅綠、枯草
接種方法:
塗布法:分別接種試驗用菌懸液於該培養基中,接種量不大於100cfu,搖勻,培養。
適用性檢查:30-35℃培養不超過3天。
判斷標準:金葡、銅綠、枯草接種後,與對照培養基比較,試驗菌生長良好。
備注:該培養基同時用於稀釋液的製備和控製菌檢查時,需考慮同時滿足計數和控製菌檢查培養基適用性檢查控製要求。
4、沙氏葡萄糖瓊脂(SDA)
無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,於20-25℃培養5天,應無菌落生長。
試驗用菌種:白色念珠菌、黑曲黴
接種方法:
塗布法:分別接種不大於100cfu允試驗用菌懸液於該平板表麵
傾注法:接種大於1cfu試驗用菌懸液於無菌平皿中,傾注約15ml該培養基,輕輕搖勻。
適用性檢查:白色念珠菌、黑曲黴於20-25℃培養不大於5天
判斷標準:與對照培養基比較菌落平均數比值在0.5-2(50%一200%)範圍且菌落大小、形態一致。
備注:如該培養基用於控製菌白色念珠菌的檢查時,同時需要滿足捌菌項下培養基適用性檢查要求。
5、沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素
無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,於20-25℃培養5天,應無菌落生長。
試驗用菌種:
抑菌性檢查:枯草芽孢杆菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌
促生長能力:白色念珠菌、黑曲黴 。
常用抗生素:
1、慶大黴素:廣譜。對G-,G+菌有較好的抗菌作用。
2、氯黴素:廣譜。對G-菌作用強;對G+菌作用不及青黴素與四環素。
接種方法:
抑菌性:接種枯草、金葡、銅綠菌懸液不少於100cfu。
促生長能力:接種白色念珠菌、黑曲黴菌懸液不大於100cfu。
適用性檢查:
白色念珠菌、黑曲黴於20-25℃培養不大於5天。
與對照培養基比較,菌落平均數比值在0.5-2範圍內。
判斷標準:枯草芽孢杆菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得生長。