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VP試驗的試驗原理、操作步驟及注意事項

郝倩倩 
錄入時間:2017-4-18 11:53:34 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、實驗原理:

某些細菌分解葡萄糖生成丙酮酸,丙酮酸可進一步脫羧生成乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在堿性環境下被氧化成為二乙酰,後者與蛋白腖中精氨酸所含的胍基起作用,生成紅色的胍縮二乙酰而呈現紅色,為VP試驗陽性。若培養基中胍基含量少,可加入少量含胍基的化合物如肌酸肌酐等(本試驗加入α萘酚)可以加速其反應。

二、試劑與器材:

1、菌種:大腸埃希氏菌、產氣腸杆菌。

2、培養基:葡萄糖蛋白腖水。

3、試劑:VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH溶液)

三、操作步驟:

Barritt法:將大腸埃希氏菌和產氣腸杆菌分別接種於葡萄糖蛋白腖水中,35℃培養24h~48h,於培養物中先加入VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)6滴,搖勻,再加入乙液(40%KOH溶液)2滴,搖勻,觀察結果。

四、試驗結果:

如立即於數分鍾內出現紅色反應者為陽性;若不出現紅色反應,可將試管置35℃孵育4h後再行觀察,仍無紅色出現者為陰性。本試驗大腸埃希氏菌為陰性、產氣腸杆菌為陽性。

五、注意事項:

滴加VP試劑甲液和乙液後需搖勻,靜置10min後才能看到紅色化合物出現。

 

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