TTC營養瓊脂的原理及實驗現象

用途：用於菌落總數測定（GB/T4789.9-2003和GB/T4789.28-2003）。

原理：蛋白腖和牛肉浸粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源；氯化鈉能維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養基的凝固劑；大多數細菌能還原TTC，使之形成易於辨別的紅色菌落，TTC還能減緩某些細菌的蔓延生長。

操作步驟：

使用前，把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。

1、製備質控菌液。

2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液1ml，接種到兩個無菌平皿中，將10ml-15ml冷至45-50℃的TTC營養瓊脂傾注於每個平皿中。小心旋轉平皿，將培養基和目標菌質控菌液充分混勻。待瓊脂凝固後，再加入3ml-4ml的TTC營養瓊脂覆蓋平板表層，以TSA為參比培養基。

3、36±1℃倒置培養基培養48±2小時，記錄實驗結果。

微生物試驗：

接種以下質控菌株，36±1℃倒置培養基培養48±2小時： 

質控菌株	菌株編號	接種量(CFU)	參比或計數 培養基	方法	質控評定標準	其他特征
金黃色葡萄球菌	ATCC25923	20-200	TSA	定量	PR≥0.7	淡紅色菌落
大腸埃希氏菌	ATCC25922	20-200			PR≥0.7	淡紅色菌落
傷寒沙門氏菌	ATCC14028	20-200			PR≥0.7	淡紅色菌落
銅綠假單胞菌	CMCC27853	20-200			PR≥0.7	淡紅色菌落

 

圖1-2  TTC營養瓊脂微生物質控結果

備注：a:金黃色葡萄球菌，b:大腸埃希氏菌，c:傷寒沙門氏菌，d: 銅綠假單胞菌

方法的局限性

本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。

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