賴氨酸鐵瓊脂（LIA）原理及現象

一、用途

 用於同時檢測腸杆菌科細菌的賴氨酸脫羧酶和產硫化氫試驗,特別用於檢測沙門氏菌和亞利桑那菌。

二、成分（g/L）及原理

    蛋白腖............................5.0
    葡萄糖............................1.0
    酵母浸粉..........................3.0
    L-賴氨酸鹽酸鹽....................10.0
    硫代硫酸鈉........................0.04
    檸檬酸鐵銨........................0.5
    溴甲酚紫..........................0.02
    瓊脂..............................12.5
    pH6.7±0.2 at 25℃

 培養基中的蛋白腖和酵母浸粉提供基本營養物質，葡萄糖為唯一可發酵碳源，硫代硫酸鈉可用於檢測硫化氫的生成，溴甲酚紫為酸堿指示劑。若細菌僅能發酵葡萄糖，則產酸使培養基變黃，斜麵由於產酸較少被氧化生成堿性物質，底層不被氧化，因此斜麵顯紫色底層顯黃色。有些細菌具有賴氨酸脫羧酶，使賴氨酸脫羧產堿，底層又變成紫色。有些細菌可還原硫代硫酸鈉產生硫化氫，並與檸檬酸鐵銨反應生成黑色沉澱。

三、試驗方法

  1、稱取本品32.0g，加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中，分裝試管，121℃高壓滅菌15min，冷至60℃左右時，製成斜麵。

  2、將質控菌株劃線後穿刺接種到培養基上。

  3、放置於35±1℃恒溫培養箱中需氧培養24±2小時。

四、結果觀察

  接種以下質控菌株，放置於35±1℃恒溫培養箱中需氧培養24±2小時。

圖1 賴氨酸鐵瓊脂（LIA）培養基微生物質控結果

五、與三糖鐵瓊脂（TSI）對比

 三糖鐵瓊脂（TSI）和賴氨酸鐵瓊脂（LIA）均用於沙門氏菌的檢測。TSI中除葡萄糖，還含有乳糖和蔗糖，絕大多數沙門氏菌不發酵乳糖和蔗糖，產硫化氫，因而在TSI上呈斜麵紅色，底層黃色，有黑色沉澱。而亞利桑那沙門氏菌中部分菌株可以發酵乳糖，在TSI上呈現出斜麵黃色，底層黃色，產硫化氫，這一現象與普通變形杆菌相同（普通變形杆菌發酵蔗糖不發酵乳糖，產硫化氫）。奇異變形杆菌（發酵葡萄糖，不發酵乳糖和蔗糖，產硫化氫）在TSI上呈斜麵紅色，底層黃色，並有黑色沉澱，與多數沙門氏菌現象一致。因此，在TSI上很難將變形杆菌與沙門氏菌區分開。在LIA上，多數沙門氏菌（包括亞利桑那沙門氏菌）由於賴氨酸脫羧酶陽性，產硫化氫，因而表現出斜麵紫色、底層紫色，底層有黑色沉澱。而變形杆菌不能將賴氨酸脫羧產堿，因而表現出斜麵紫色，底層黃色，底層有黑色沉澱。與TSI相比，LIA能將沙門氏菌與變形杆菌區分開來，特別是有利於亞利桑那沙門氏菌的檢測。

圖2 LIA與TSI斜麵上沙門氏菌和變形杆菌的對比

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